荨麻中植物多糖的提取分离及药理作用的研究

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多糖属于天然大分子物质,是构成所有生命有机体的重要组份,维持机体的各种生理功互相关联。经过多年研究发现多糖具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒、降血糖、抗衰老、防辐射、抗凝血、降血糖血脂等多种生物活性。荨麻为被子植物门、荨麻科(Urticaceae)、荨麻属(Urtica.L.),是植物荨麻Urtica fissaE.Pritz.的干燥全草,它属一年生或多年生野生草本植物,荨麻自然生长在山坡,道路旁,草丛和原始森林中。这一廉价的药用多糖类资源在抗肿瘤、抗氧化方面的研究比较鲜见,对其药理作用的研究具有重要的意义及价值。在本课题中,我们选择植物荨麻(Urtica fissa E.Pritz)作为研究对象,具体做了以下几个方面的研究:采用水提醇沉法提取广西荨麻的总多糖,并用葡萄糖标准曲线测定其中多糖的含量。采用加热处理加速多糖释放的提取方法,在加热提取之前,先将药材粗粉石油醚回流,以除去一部分脂溶性分,对脱脂后的药材粗粉采用水提醇沉的方法进行提取,采用正交实验确定了荨麻中植物多糖提取的最佳条件为A1B2C1D3,即浸泡2h,回流2次,每次提取2h,温度为85℃。然后采用seavge法除蛋白,H202氧化透析除去色素,将除蛋白、色素后的多糖分别用95%乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,得到精致的荨麻中多糖类成分。对精制多糖进行体内抗肿瘤、抗氧化,体外抗氧化作用的研究。实验考察了:(1)荨麻多糖对H22荷瘤小鼠实体瘤的抑制作用。(2)荨麻多糖对H22荷瘤小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响、谷胱甘肽(GSH)活性的影响、过氧化氢酶(CAT)活力的影响、丙二醛(MDA)的影响。(3)荨麻多糖抑制羟自由基活性、超氧阴离子自由基活性的能力。实验以荨麻对所提取到的多糖类成分进行定性定量分析,结果表明,我们所提取到的晶体是荨麻中多糖类成分,并且其含量为98.22mg/g,得率为1.56%,纯度为62.61%。由此我们大致估算了一下要提取的原药材的质量,进行大规模的提取精制,为以后的药效学研究做好充足准备。实验观察到荨麻中植物多糖高、中、低剂量组可以显著抑制小鼠肿瘤增长,抑制率分别为33.13%、29.43%、l3.78%,且结果具有统计学意义(P<0.05);荨麻中多糖可不同程度的升高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数,显著提高荷瘤小鼠生存质量。在体内抑瘤实验中,高、中、低剂量组组荷瘤小鼠血清的SOD、GSH、CAT舌性高于正常组,而MDA含量低于正常组,其结果具有统计学意义(P<0.05)猜测荨麻多糖的抗肿瘤作用可能与其能增强机体抗氧化能力,抑制脂质过氧化反应有关。通过对体外荨麻中多糖对02-清除效果、对-OH的清除效果,初步证明荨麻多糖具有一定的抗氧化作用。荨麻多糖提取物在不同的抗氧化体系中均表现出一定的抗氧化活性。其存各体系中,其抗氧化能力均弱于标准对照品。总体来看,荨麻多糖具有一一定的清除羟基自由基和清除超氧阴离子能力。
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