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目的:胶质瘤是中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤。高发病率、复发率、死亡率及较低的治愈率是其重要特征。近年来研究表明,Wnt通路的异常调节在胶质瘤生长及恶性进展过程中起到了至关重要的作用。与正常脑组织比较,胶质瘤中β-catenin和TCF4表达均有上调,从而抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡。相关研究表明,TCF4在肾癌、结直肠癌、肝细胞癌及脑肿瘤中都存在高表达现象。异常增加的TCF4能够刺激下游靶基因是常见的肿瘤发生的早期事件。人类TCF4基因包含17个外显子。最近的研究表明,TCF mRNA通过可变剪接形成不同的剪接异构体,这与调节Wnt信号通路的转录和肿瘤发生都有相关性。各种类型的癌症包括肾癌、结直肠癌和脑部肿瘤中发现了不同的TCF4剪接异构体。然而,TCF4剪接异构体在神经胶质瘤的发生发展过程中的作用还有待阐明。本实验拟确认三种胶质瘤细胞系中TCF4剪接异构体的种类,并研究三种兴趣异构体对U251细胞系的增殖、凋亡及迁移的影响。方法:我们在含有青霉素(100 U/ml)、链霉素(100 μg/ml)、胎牛血清(10%)的DMEM培养基中成功培养人U251、A172、U-87MG胶质瘤细胞系。应用RT-PCR技术对三种胶质瘤细胞系中TCF4进行基因扩增,随后进行基因比对。选取三种异构体进行TCF4异构体质粒构建,并转染U251细胞系。随后通过MTT比色法、流式细胞技术及细胞划痕实验检测转染后不同时期细胞的增殖、凋亡、迁移变化。最后进行统计分析。结果:在我们研究中,U251细胞中发现13种不同的剪接异构体,其中3种剪接异构体(vx35/vx18/vx7)通过比对基因库排名靠前。A172细胞中发现19种不同的剪接异构体,其中3种剪接异构体(vx18/vx27/vx21)通过比对基因库排名靠前。U87-MG细胞中发现12种不同的剪接异构体,其中3种剪接异构体(vx27/vx18/vx21)通过比对基因库排名靠前。MTT实验表明,剪接异构体vx35、vx18、vx7转染的U251细胞在48h及60h细胞增殖与对照组比较均受到明显抑制(P<0.001)。流式细胞技术表明,vx35、vx18、vx7转染的U251细胞与对照组比较细胞凋亡数目明显增加(P<0.001)。划痕实验表明,vx35、vx18、vx7转染的U251细胞迁移程度与对照组比较明显降低(P<0.001)。结论:通过我们的实验,成功检测到三种人胶质瘤细胞系中存在的多种TCF4剪接异构体。并在U251细胞系中对其中三种剪接异构体的功能及特性进行了研究。结果表明TCF4剪接异构体能够抑制细胞的增殖、诱导细胞的凋亡及迁移。我们推测以Wnt/β-catenin介导的TCF4剪接异构体转录的基因调节在胶质瘤发生原因中起到一定作用。