狂犬病是由狂犬病毒(RV)引起的一种重要的人兽共患传染病,死亡率几乎为100%。我国狂犬病疫情严重,已成为严重危害公共卫生安全的重要疫病,我国在世界上属狂犬病高发地区,发病和死亡人数仅次于印度,居世界第二位,且有上升趋势。为增强对狂犬病的检测、诊断能力以及对狂犬病毒的抗原分布、变异情况和其它分子生物学方面的研究,我们拟以狂犬病毒为抗原来制备抗狂犬病毒的单克隆抗体,在此基础上做进一步的研究工作。我们先将正常BHK-21细胞培养的狂犬病弱毒疫苗株SRV9进行鼠脑复壮,使其恢复并保持较高的免疫原性;然后回归细胞进行传代、培养,并以电镜跟踪检测其形态发生情况,待狂犬病毒数量巨大且大量释放于细胞膜外时收获病毒。然后将收获的病毒进行浓缩、纯化,获得了较高浓度、纯度且形态良好的狂犬病毒,可用于下一步的免疫工作。利用提纯的狂犬病毒免疫Balb/c小鼠,制备了针对狂犬病毒的稳定、高效价、高特异性的单克隆抗体,并成功进行了荧光素的标记,建立了直接、间接荧光检测方法及捕获ELISA方法,对本实验室保存的我国部分狂犬病流行毒株进行了初步鉴定并观察其反应模式的不同,分析了可能存在的抗原变异情况。