【摘 要】
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大球盖菇是一种可食用的大型真菌,富含多糖、蛋白质、矿物质等多种活性成分,其中大球盖菇多糖被发现具有多种生物活性,但其结构表征、分子修饰等研究较少。因此本研究经过提取分离得到一种新的大球盖菇子实体多糖（SP-1a）,对其结构进行表征后,分别采用羧甲基化和磷酸化进行修饰,并评估了SP-1a及其衍生物的体内外活性。以下为主要的实验结果:（1）均一组分SP-1a的分子量为22.907 kDa,其由葡萄糖、
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大球盖菇是一种可食用的大型真菌,富含多糖、蛋白质、矿物质等多种活性成分,其中大球盖菇多糖被发现具有多种生物活性,但其结构表征、分子修饰等研究较少。因此本研究经过提取分离得到一种新的大球盖菇子实体多糖（SP-1a）,对其结构进行表征后,分别采用羧甲基化和磷酸化进行修饰,并评估了SP-1a及其衍生物的体内外活性。以下为主要的实验结果:（1）均一组分SP-1a的分子量为22.907 kDa,其由葡萄糖、半乳糖及岩藻糖组成,摩尔比为61.48:35.19:3.33,主链由[→3)-Glcp（1→]和[→3,6）-Glcp（1→]组成,支链由[→6）-Galp(1→]组成,末端存在T-Glcp和少量T-Fucp。采用体外模拟唾液、胃液和肠液模型并结合理化性质与体外抗氧化活性,研究SP-1a在体外模拟消化体系中的变化。结果表明:SP-1a在唾液中不被消化;而在模拟胃肠消化时,消化液中的还原糖含量不断增加,SP-1a的分子量逐渐减小,其表面形态由大块片状变为网状聚集体,并且在高温下显现出不同的热解反应。此外体外抗氧化实验结果显示SP-1a胃消化产物具有较大的·OH清除率,肠消化产物具有较强的DPPH清除率及还原力。因此,SP-1a可在模拟胃肠体系中被消化,且其胃肠消化产物具有较强的抗氧化活性。（2）采用氯乙酸法修饰获得羧甲基化多糖（CSP-1a）,三偏磷酸钠和三聚磷酸钠法修饰获得磷酸化多糖（PSP-1a）。其取代度分别为0.459和0.118,红外光谱显示有O-COO和C-O-P的特征峰出现,核磁图谱显示羧甲基化修饰主要与1,6-Galp的C2、1,3-Glcp的C6和T-Glcp的C6位的羟基发生取代,31P谱显示糖环上至少发生了三处磷酸取代。修饰后的SP-1a具有更好的复水性和热稳定性。此外体外活性结果表明羧甲基化修饰多糖（CSP-1a）显示较强的抗氧化和酶抑制活性以及胆酸钠结合能力,磷酸化修饰多糖（PSP-1a）有显著性的羟基自由基清除能力。（3）通过饮用含葡聚糖硫酸钠（DSS）的无菌水建立溃疡性结肠炎小鼠模型,评估不同剂量的SP-1a、CSP-1a和PSP-1a对溃疡性结肠炎小鼠的保护作用。结果显示SP-1a及其衍生物的干预能够缓解由DSS所致的体重减轻、结肠缩短和便血等症状。SP-1a及其衍生物可通过上调ZO-1表达来恢复肠道屏障完整性。此外,SP-1a及其衍生物可通过减少氧化应激和抑制促炎因子、促炎蛋白的表达以及调控NF-κB信号通路从而起到抗炎作用,且CSP-1a和PSP-1a的抗炎效果优于SP-1a。这些结果表明SP-1a可作为一种潜在的保护由DSS诱导的结肠炎的天然药物。
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