雨生红球藻中虾青素合成关键酶基因的顺式作用元件研究

来源 :中国科学院海洋研究所 | 被引量 : 17次 | 上传用户:yeyuan1985
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虾青素是一种具有极强抗氧化活性的类胡萝卜素,具有广泛的应用价值.雨生红球藻是一种单细胞绿藻,在多种逆境胁迫条件下能够大量合成并迅速积累虾青素,其积累量最高可达细胞干重的4﹪,从而成为目前最理想的天然虾青素合成工具.β-胡萝卜素羟化酶(CRTR-B)和β-胡萝卜素酮化酶(BKT)是两个关键酶,它们共同作用转化β-胡萝卜素形成氧化型类胡萝卜素——虾青素.已有研究结果表明,这两个合成酶基因的表达调控至少是部分发生在转录水平上的,这就为我们从转录水平上研究虾青素生物合成关键酶基因的调控机制提供了重要线索..本文在上述工作基础上,通过利用基因组上游步移技术对这两个关键酶基因分别进行了步移,克隆了crtR-B基因的一个5上游侧翼序列(900bp),对其启动子类似区(-378/-22)中包含的三种功能元件的定点突变结果表明,ABRE(脱落酸反应元件)元件对于基因自身转录可能存在一定影响;同时运用缺失突变并结合瞬间表达技术验证了crtR-B基因5上游侧翼序列中可能包含的抑制子区(-919/-378).
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