红松松塔二萜天然纳米载药体系构建及其抗乳腺癌研究

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenyanqing
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乳腺癌是全球女性健康的最大威胁之一,化疗是最常使用的一种治疗手段,公认的化疗药物紫杉醇(PTX)由于水溶性差导致生物利用度低、靶向能力差,而且长期使用会产生耐药性并加速转移。一系列合成聚合物和无机分子所构建的纳米载体为解决上述问题提供了可能性,但它们对人体的副作用限制了其临床应用。天然产物因具有良好的生物活性和低毒性具备设计成纳米载体的潜力。本文中用于乳腺癌治疗的二萜天然产物纳米载药体系被构建,为药物递送领域开发新的纳米平台奠定了良好的基础。本课题主要研究内容与结果如下:首先,从红松松塔中提取分离三环二萜并对其结构进行鉴定。红松松塔经二氯甲烷提取后柱层析分段,从石油醚洗脱物分离纯化得到化合物1和2,从二氯甲烷洗脱物分离纯化得到化合物3和4。结合波谱数据及理化性质化合物1-4分别鉴定为脱氢枞酸(dehydroabietic acid,DA)、松香酸(abietic acid,AA)、12-羟基松香酸(12-hydroxyabietic acid,12-OH AA)、15-羟基脱氢枞酸(15-hydroxy-dehydroabietic acid,15-OH AA)。其次,制备三环二萜天然产物纳米颗粒并分析分子间作用力。采用反溶剂沉淀法和乳化挥发法制备纳米颗粒,乳化挥发法因较高的得率及低PDI值而被选择。化合物1-4分别运用乳化挥发法制备纳米颗粒,AA因良好的形貌及分散性更适宜作为纳米载体,经过优化确定AA NPs的制备条件—乳化溶剂为二氯甲烷,油水比1:3,表面活性剂2.5%PVA。扫描电镜显示AA NPs的形貌呈球形,粒径为255 nm,PDI值为0.086,Zeta电位为-29.4 mV。通过红外光谱、接触角及X射线衍射证明氢键和疏水相互作用为AA NPs形成的驱动力。最后,AA NPs对PTX进行装载进行体外纳米效应评价及体内外抗乳腺癌研究。运用乳化挥发法制备的载药纳米颗粒(AA-PTX NPs)包封率为65.12%,装载率为11.70%,并呈现出一定的缓释性能和良好的稳定性。MTT结果显示AA-PTX NPs对乳腺癌细胞(4T1和MCF-7)具有强杀伤作用,IC50值分别为3.70μg/mL和2.94μg/mL。溶血率测定结果显示其具有良好的生物相容性。体内研究表明AA-PTX NPs具有显著的肿瘤抑制作用,肿瘤体积抑制率和质量抑制率分别为81.83%,82.50%。整个给药期间,小鼠体重无明显变化,表明AA-PTX NPs未产生明显毒副作用,同时脏器指数最接近正常值。AA构建的纳米载药体系展现出的良好生物相容性和优异抗乳腺癌活性凸显了天然产物的优势。
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