【摘 要】
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目的 钙/钙调素依赖性蛋白激酶-Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CaMKⅡ)是一种多功能蛋白激酶,分为α、β、γ、δ 4种基因类型,编码至少二十种亚基.其
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目的 钙/钙调素依赖性蛋白激酶-Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CaMKⅡ)是一种多功能蛋白激酶,分为α、β、γ、δ 4种基因类型,编码至少二十种亚基.其中α、β两种亚基在中枢神经元广泛表达,在调控神经元离子通道和神经元兴奋性等方面发挥重要的作用.该研究旨在通过检测氯化锂-匹罗卡品腹腔注射致痫大鼠模型不同时间点海马各区和颞叶皮质内CaMKⅡ α、β亚基mRNA的动态表达,探讨CaMKⅡα、β亚基在癫痫(epilepsy)发病机制中的作用.方法 ①模型制作:6-8周龄健康雄性Sprague-Dawley大鼠94只,体重200-220g,随机分为两大组:实验组(A组,n=54只)、生理盐水对照组(B组,n=36只)和正常对照组(C组,n=4只),两组又随机分为9个亚组(A<,1-9>亚组,n=6只;B<,1-9>亚组,n=4只).实验组给予LiCl<,2>125mg/kg腹腔注射预处理18小时后分6次腹腔注射匹罗卡品60mg/kg,30分钟/次,直至诱发癫痫持续状态为止.生理盐水对照组用生理盐水代替腹腔注射.根据Racine标准判定癫痫发作程度.癫痫发作后每天8AM~8PM观察动物行为活动,有无自发性发作.致痫后3hr、6hr、12hr、24hr、48hr、7d、15d、30d、60d不同时间点处死大鼠;②Nissl染色观察海马病理改变;③用原位杂交技术检测不同时间点海马齿状回、CAi区、CA3区和颞叶皮质CaMKⅡα、β亚基mRNA的表达.结论 ①CaMKⅡα亚基mRNA表达持续显著降低可能参与抑制颞叶癫痫的发作;③CaMKⅡβ亚基mRNA表达可能与颞叶癫痫的发作无关.
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