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目的：探讨重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin, rhEPO)对高糖作用下体外混合培养大鼠视网膜神经细胞凋亡的保护作用及与Bcl-2蛋白表达的影响。方法：取出生1-3天大鼠,取其视网膜,通过0.125%胰蛋白酶消化制成单细胞悬液,建立一个稳定可靠的体外培养视网膜神经细胞的方法,用台盼蓝染色观察不同浓度葡萄糖对视网膜神经细胞形态、生长状态及存活数的影响,并采用免疫细胞化学技术对视网膜神经细胞进行鉴定。将体外混合培养3天的原代大鼠视网膜神经细胞随机分为高糖培养组、对照组和各浓度rhEPO处理组,rhEPO处理组在高糖培养液中分别加入rhEPO,终浓度为5、10、20、40U/ml,培养48h后,用MTT法检测,评价在培养液中加入rhEPO对高糖损伤视网膜神经细胞活力的影响,同时采用免疫细胞化学半定量方法,检测不同浓度rhEPO处理后高糖损伤神经细胞中Bcl-2蛋白的表达水平。结果：免疫细胞化学染色显示,体外培养的细胞大部分抗NSE抗体反应呈阳性,该方法培养的神经细胞纯度可达到90%以上。在高浓度葡萄糖条件下,体外培养的视网膜神经细胞活性下降,且细胞大量凋亡,本试验对不同浓度的葡萄糖以及不同干预时间的神经细胞活性进行比较,选取30mmol/L葡萄糖干预48小时的条件来制备神经细胞高糖模型。经rhEPO处理后的结果表明,外源性应用rhEPO对神经细胞的高糖损伤具有保护作用,各rhEPO组经rhEPO处理后均可有效增强Bcl-2蛋白的表达(P<0.05),而且具有时间和浓度依赖性。结论：rhEPO处理可以保护体外培养的高糖状态下的视网膜神经细胞的凋亡,且具有浓度和时间依赖性,并能显著增强Bcl-2蛋白的表达,提示Bcl-2蛋白的高表达可能是rhEPO保护视网膜神经细胞凋亡的作用机制之一。