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自上个世纪H9N2亚型流感病毒(Avian Influenza virus,AIV)被发现以来,H9N2亚型禽流感病毒已经在全世界广泛流行。虽然H9N2亚型禽流感病毒属于低致病性流感病毒,但仍能给养禽业造成了极大的经济损失;同时,H9N2亚型AIV可以直接感染人,并可以向其它病毒提供内部基因,给公共卫生安全带来了巨大隐患,对人类的健康构成了严重的威胁。尽管如此,目前有关H9N2亚型AIV传播能力是否增强尚未见有报道。本试验对在2013-2015年从山东、湖南、湖北、安徽、上海、广东等地区分离获得的107株H9N2亚型禽流感病毒的遗传进化、抗原性及传播能力等进行了详细分析,试验结果表明:1、对2015年分离的25株H9N2亚型禽流感病毒全基因序列进行了分析,并构建了2013-2015年H9N2亚型禽流感病毒8个基因的系统发育树,结果表明,目前我国流行的H9N2亚型流感病毒HA基因主要位于CK/Beijing/1/94的SubgroupⅡ这一分支,PB1、PA、NP、NA基因均属于欧亚分支中的CK/Shanghai/F/98亚系,而PB2、M和NS基因进化较大,形成了新的分支,属于CK/Zhejiang/B2013/12。2、通过对H9N2亚型AIV基因型分析发现,2013-2015年流行的H9N2亚型AIV为B69基因型,与2009-2012年的流行毒株基因型一致。3、通过血凝抑制试验,对2009-2015年从山东、湖南、湖北、安徽、上海、广东等地区分离到的21株H9N2亚型禽流感病毒的抗原性进行了分析,结果发现,2013-2015年流行株抗原性发生了变化,与疫苗株CK/Shanghai/F/98抗原性有差异,形成了新的抗原性;同时,毒株CK/Zhejiang/F242/15无论与早期毒株还是与2013-2015年分离的近期毒株相比,抗原系数差异都较小,有望成为研制H9N2亚型禽流感疫苗的候选毒株。4、对1998、2003、2004、2006年分离到的H9N2亚型AIV株和2009、2011、2012年分离到的H9N2亚型AIV流行毒株在鸡上的复制及传播能力进行了比较分析,试验结果表明,从排毒能力来看,2009年之后分离的H9N2亚型AIV要强于2006年之前毒株,2009年之后毒株在咽拭子和泄殖腔中皆能检测到,且病毒滴度高于2006年之前毒株,而2006年之前毒株只能在咽拭子中检测到;从体内复制水平来看,2009年之后的毒株在气管及肺中的病毒滴度远高于2006年之前毒株;从传播能力来看,流行株在鸡上皆具传播能力,而2006年之前毒株在鸡上传播能力较弱,传播能力的差异可能与病毒受体结合特性相关。5、受体结合试验结果表明,2006年之前的H9N2亚型AIV毒株皆结合于α-2,3唾液酸,而2009年之后的H9N2亚型AIV流行株从α-2,3唾液酸转变为α-2,6唾液酸,表明H9N2亚型AIV流行株在鸡只上传播能力增强的主要原因可能是其受体特异性从α-2,3唾液酸转变为α-2,6唾液酸。本试验对我国H9N2亚型AIV流行株的遗传进化、抗原性及传播性等进行了分析,为H9N2亚型AIV的监测及防控奠定了理论基础;同时,H9N2亚型AIV的危害不容忽视,市场尚无适合疫苗,而本课题组已经合成了多糖佐剂并构建了兽用疫苗黏膜免疫递送系统,本试验研究可为课题组后续研制H9N2亚型禽流感纳米疫苗提供模型抗原,也可为研制和改进H9N2亚型禽流感弱毒苗、灭活苗等疫苗提供候选株。因此,本试验研究对合理开发新型疫苗、改进现有疫苗至关重要,具有一定的理论意义和潜在的推广应用前景。