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苹果病毒病是影响我国苹果栽培水平提升的重要因素之一,而繁育和推广无病毒苗木是解决这一问题最为有效的技术措施。为了加快苹果新品种脱毒苗木的培育与推广,促进苹果脱毒苗木的标准化生产,本试验利用课题组已经获得的部分苹果品种(系)脱毒试管材料,借鉴国内外苹果脱毒种苗繁育技术经验,对无病毒原种材料繁育的关键环节进行了优化,初步提出了苹果接穗品种无病毒种苗繁育技术体系。取得的主要研究结果如下:1.针对苹果品种组培苗试管扩繁过程中出现的内生菌污染问题,在培养基中加入氨苄青霉素、羧苄青霉素和卡那霉素3种抗生素,进行了抑菌效果观察。结果显示,3种药剂的用量浓度与抑菌效果呈正相关,低浓度的抗生素能够促进试管苗不定芽的分化,在使用剂量上单独使用羧苄青霉素选择压力浓度应不超过200 mg·L-1,以氨苄青霉40 mg·L-1+羧苄青霉素80 mg·L-1时试管苗生长质量和抑菌效果能得到最佳平衡,且在25 d内对细菌有明显抑制效果。卡那霉素毒性较强,不宜采用。2.3个苹果品种最适驯化移栽条件:选择根系愈伤组织小、根数大于4条、根长在3 cm以上的生根试管苗,先闭瓶炼苗5 d,再开瓶炼苗5-7 d,以草炭:珍珠岩=5:1基质配方,移栽后前10 d左右保持空气湿度在90%-100%,缓苗快,成活率可在80%以上。3.为检验品种苗木脱毒效果,采用单重RT-PCR法对栽植于田间网室的脱毒试管苗进行了病毒复检,结果显示,在田间网室内保存的1年生材料,均不带ASPV、ASGV和ACLSV等苹果主要病毒。4.为了解脱毒试管苗田间移栽生长情况,对其田间生长动态进行了观察。结果发现,1年生脱毒苗木在4-5月生长较为缓慢,6-8月为快速生长期,其中7月份是全年生长量最大的时期,9月开始滞缓生长,10月以后基本停止生长。为促进脱毒苗健旺生长,在生长前期和中期,应加强水肥供应,控制病虫害;在8月下旬开始要控制氮肥施用,促进枝芽充实,避免苗木虚旺生长。5.对于炼苗期间生长点受阻滞的幼苗,采用50-100 mg·L-1的赤霉素(GA3)溶液喷洒处理,相隔5-6 d一次,连续喷洒2-3次,可促进新梢生长。对2年生的试管脱毒原种苗,为增加采穗数量,减少“返童”风险,可采取饱满芽定干、疏除竞争梢、中下部新梢连续摘心等措施,促进顶端新梢健旺生长。