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目的：建立外周血单核细胞体外诱导树突状细胞（dendritic cells，DC）以及细胞因子活化的T细胞培养体系，初步探讨经齐墩果酸（oleanolic acid，OA）处理的DC对活化T细胞的影响。体外检测经不同浓度（25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml）齐墩果酸处理后的DC细胞膜表面标志、形态以及细胞因子分泌的异同。 方法：取健康成人外周血，分离单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC），用细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素-4（IL-4）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导培养并获得DC；以细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素1α（IL-1α）、干扰素-γ（IFN-γ）以及CD3单克隆抗体（CD3McAb）刺激制备活化T细胞；在DC细胞培养体系内添加不同浓度的OA，分别记为OA-DC-I组（25μg/ml）、OA-DC-II组(50μg/ml)、OA-DC-III组(100μg/ml)、OA-DC-IV组(200μg/ml)。培养至7天用流式细胞学检查DC细胞膜标志；酶联免疫斑点测定法（enzyme-linked immunospot assay.ELISPOT）检测DC对活化T细胞分泌细胞因子水平的影响。 结果: 1. DC形态及表型分析，比较OA对DC表型的影响： DC形态观察：从健康成人外周血分离单核细胞，培养箱中培养2小时，贴壁细胞用于诱导生成DC。培养至第7天倒置显微镜下可见部分细胞变大，不规则，伸出伪足，呈典型树突状细胞。 DC表型分析：流式细胞仪检测DC以及OA-DC表面分子表达情况。培养第7天DC细胞表面分子CD86/CD80、CD83和HLA-DR表达分别为：DC组1355.88±2880.12，92.21±18.19和1034+279.18； OA-DC-Ⅰ组1298.54±198.87，91.22±18.70和1166.76+267.78； OA-DC-Ⅱ组1143.77±201.32，90.09±17.65和1105.54+251.78；OA-DC-Ⅲ组897.54±197.45，68.11±18.20和503.57+98.02； OA-DC-Ⅳ组564.33±187.69，8.89±2.21和21.37+2.02。与 DC细胞比较，OA可以显著降低CD86+/CD80+表达（P<0.05）。HLA-DR+和CD83的表达在DC、OA-DC I组和II组之间比较无显著性差异（P>0.05），但随着OA浓度的增加，其表达量显著降低，DC细胞、OA-DC III组和IV组有极显著差异（p<0.01），这说明OA可以抑制DC成熟。 2. ELISPOT法检测OA处理后的DC对活化T细胞分泌IFN-γ的影响： 计数并调整好细胞浓度，在已包被好的ELISPOT板中分别加入经不同浓度OA处理的DC与活化T细胞共培养，ELISPOT READER定量检测发现，IFN-γ分泌量随着OA浓度的增加，分泌IFN-γ的免疫细胞数显著降低（p<0.01）。 结论:OA可以抑制DC的成熟，而经过OA处理的DC与活化T细胞共培养后，活化T细胞分泌IFN-γ能力受到抑制。