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第一章中主要对单分子检测作了简要的综述,单分子检测技术可用于生物分析检测的多个领域,应用在单分子检测中的技术也有很多种,在分析化学领域里,单分子检测达到了分析检测的极限,目前单分子检测的主要包括化学法和光学法两大类,本章主要对激光共聚焦荧光显微术,全内反射荧光显微术和落射荧光显微术的原理及在单分子检测中的应用进行了介绍。第二章中主要讲述了杂交富集单分子计数法的原理以及单细胞中mRNA测定原理及方法,并将杂交富集单分子计数法应用到单细胞中β2M mRNA的测定,采用目标DNA富集9h时,绘制不同浓度DNA检测的工作曲线,此时线性范围为8.0×10-18mol/L-1.0×10-15mol/L,在没有PCR扩增的前提下测定了人体乳腺癌细胞中β2M mRNA的含量,证明了该方法测定mRNA的可行性。第三章中我们报道了一种超灵敏的只需1.8nL样品的单分子计数DNA微点检测方法,设计点样程序,将目标(?)DNA (tDNA)(?)用点样机点在结合了捕获DNA(DNA1)(?)(?)盖玻片上刨建直径为300μm的微点,然后用乙醇胺和牛血清蛋白进行封闭,这样通过tDNA和DNA1(?)的杂交将tDNA组合到盖玻片上,之后将tDNA用事先修饰好量子点的检测DNA标记,接下来,将微点在全内反射诱导荧光的激发下用微点读出系统进行荧光成像。采用这种方法,至4×10-22mol(240个分子)DNA能被检测出,线性范围为6.0×10-22mol到1.2×10-19mol,所有的数据采集及处理采用MetaMorph软件。该方法可以用于在没有PCR扩增的条件下,单细胞内骨桥蛋白(OPN)的信使核糖核酸(mRNA)的检测。第四章,将分别用AMCA、FAM、Cy5染料标记的DNA修饰到粒径为300nm的链酶亲和素修饰的磁性亚微米珠上,根据光的三原色原理,采用落射荧光显微术分别获得磁球的蓝,绿,红三基色荧光图像,将得到的荧光图像叠加后得到磁球的实际荧光图像,通过控制三种染料的比例,制备了22种编码微球,制备的这些编码可以实现生物分子的同时测定。第五章中我们报道了一种固相荧光共振能量猝灭(FREQ)(?)超灵敏检测对苯二酚(DHB)的方法,该法采用固定在二氧化硅纳米粒子上的筑基于二酸(MSA)包被的CdTe量子点(CdTe-QDs)作为能量供体。在这种方法里,二氧化硅纳米粒子表面先修饰一层3-氨丙基三乙氧硅烷(APTS),然后将MSA包被的CdTe-QDS通过与APTS氨基的键合固定到二氧化硅粒子的表面,最后,溶液中的对苯二酚通过与二氧化硅表现剩余氨基的静电作用结合到二氧化硅纳米粒子的表面,固(?)、(?)FREQ的猝灭效率比液相(?)FREQ高200倍,采用这种超灵敏的固相FREO方法检测(?)DHB(?)的检测可低至2.4×10-12mol/L,我们还将这种方法应用到水样中DHB的测定。