CD4+CD25+调节T细胞在原发性免疫性血小板减少症中的表达及意义

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背景免疫性血小板减少症(Primary immune thrombocytopenia,ITP)是一种免疫相关的出血性疾病,该疾病血小板受自身抗体调节,并被脾脏内皮细胞系统的Fc受体相关的吞噬作用所破坏。自身免疫过程也被认为是这种疾病的发病机制。CD4~+CD25~+调节T细胞(Regulatory T cells,Treg)在自身免疫性疾病中发挥重要作用,越来越多的研究发现ITP患者中存在Treg细胞数量异常,从而导致免疫耐受失调。循证医学研究显示,各种方案治疗后的ITP患者,Treg细胞在外周血中的数量和免疫功能均发生了变化。目的通过实时荧光定量及流式细胞术方法检测ITP患者及健康志愿者外周血中Treg细胞的表达,分析Treg细胞在ITP患者与对照组中的差别及ITP患者治疗前后Treg细胞表达的变化,了解其对ITP发病及激素敏感性有无提示意义。方法病例组:按入选标准,选取2016年1月至2017年8月新乡医学院第一附属医院血液内科住院的新诊断ITP患者,共40例。根据激素治疗2周后效果将ITP患者分为激素敏感组和激素不敏感组,其中激素敏感组:32例,激素不敏感组:8例。对照组:健康志愿者30例。所有入选患者均知情同意并签署知情同意书。准确记录患者临床资料:年龄、性别、既往病史等及临床检测指标:血常规、T淋巴细胞亚群、骨髓巨核细胞数。采用实时荧光定量PCR技术检测对照组及病例组治疗前后外周血中的FOXP3表达量,采用流式技术检测对照组及病例组治疗前CD4~+CD25~+T细胞及CD4~+CD25~+CD127~-T细胞占CD4~+T细胞的比例。比较上述人群上述检查指标,并做统计学分析。结果与对照组相比病例组外周血CD4~+CD25~+T细胞和CD4~+CD25~+CD127~-T细胞比例较低,分别为[(14.91±1.96)%vs(12.75±2.42)%,(P=0.015)];[(8.30±1.1)%vs(7.16±2.63)%,(P=0.034)]。与激素敏感组相比激素不敏感组外周血CD4~+CD25~+T细胞和CD4~+CD25~+CD127~-T细胞比例较低,分别为[(13.80±1.87)%vs(9.86±0.90)%,(P<0.01)];[(7.70±1.7)%vs(5.40±1.02)%,(P<0.01)]。与对照组相比病例组治疗前外周血FOXP3表达量较低[(2.59±1.33)vs(1.49±1.27),(P<0.01)];治疗后FOXP3表达量升高[(1.49±1.27)vs(2.12±1.43),(P=0.04)];治疗后与对照组无明显差别[(2.59±1.33)vs(2.12±1.43),(P=0.162)]。与激素敏感组相比,激素不敏感组治疗前外周血FOXP3表达量较低[(1.75±1.28)vs(0.45±0.32),(P<0.01)]。治疗后与激素敏感组相比,激素不敏感组外周血FOXP3表达量较低[(2.48±1.36)vs(0.65±0.29),(P<0.01)]。与治疗后相比,治疗前激素不敏感组外周血FOXP3表达量无明显差别[(0.65±0.29)vs(0.45±0.32),(P=0.211)];治疗前激素敏感组外周血FOXP3表达量较低[(2.48±1.36)vs(1.75±1.28),(P<0.05)]。与对照组相比病例组治疗前外周血CD4~+细胞百分率较低[(41.8±3.77)%vs(37.82±2.83)%,(P<0.01)]而CD8~+细胞百分率较高[(25.99±3.18)%vs(28.84±5.19)%,(P<0.01)],CD4~+/CD8~+比值较低[(1.36±0.27)%vs(1.61±0.59)%,(P<0.01)]。与激素敏感组相比,激素不敏感组外周血CD4~+细胞比例无差别[(37.96±3.07)%vs(35.98±2.15)%,(P=0.094)],CD8+细胞百分率较高[(27.71±4.72)%vs(33.35±4.73)%,(P<0.01)],CD4+/CD8+细胞比例较低[(1.41±0.27)%vs(1.10±0.16)%,(P<0.01)]。ITP患者骨髓巨核细胞的高低对治疗结果有影响,入院时骨髓巨核细胞>35者激素治疗有效率高于骨髓巨核细胞≤35者,差异有统计学意义(60%vs 92%,P<0.05)。40例患者中,出现转外科手术切除脾脏患者1例,自动出院患者2例,采用二线方法治疗者7例,其中手术及应用二线方案者均为激素治疗不敏感患者。结论1.CD4~+CD25~+调节T细胞在ITP患者中明显降低。2.CD4~+CD25~+调节T细胞在激素敏感与不敏感患者中存在明显差异,在激素不敏感患者中数量明显降低,或许可以作为病人早期对激素敏感性的预判指标。3.激素治疗效果与骨髓巨核细胞的数量呈正相关。
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