中国李‘Nubiana’离体培养与再生研究

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本研究以中国李(Prunus salicina Lindl.)品种Nubiana为材料,以茎尖和茎段为外植体建立了快速繁育体系,探讨了最佳增殖培养基配方、影响生根的因素;以Nubiana无菌苗叶片为材料,研究了植物生长调节剂种类及其浓度组合、培养基类型和碳源等因素对愈伤组织诱导率的影响,以及初步探索叶柄再生途经。主要研究结果如下:1.以Nubiana李茎段或茎尖为试材,通过对试管苗增殖倍数,平均株分化芽数分析表明,Nubiana李的最适宜的初代培养基及其植物生长调节剂组合是:LP+6-BA0.4 mg/L+IBA0.08 mg/L;并探讨了腺嘌呤(Ad)对无菌苗增殖的影响,筛选出1.5~2.0 mg/L的Ad对无菌苗的增殖有较好的效果。2.从IBA的浓度、基本培养基与碳源三个方面探讨了对无菌苗生根的影响,结果表明,适宜的培养基配方是:1/2 WPM+IBA 0.5 mg/L+Glu 15 g/L。暗培养放置7 d后转移到光下培养,能达到较好的效果。3.从生长调节剂组合,基本培养基,不同的碳源及不同浓度的葡萄糖等几个方面探讨了对Nubiana李叶片愈伤组织诱导影响,筛选出最适宜诱导愈伤组织的培养基配方是:WPM+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+Glu 30~50g/L;柠檬酸(CA)对无菌苗叶片愈伤组织诱导影响研究中,筛选出0.075~0.1%CA对诱导叶片愈伤组织有显著的促进作用,最高达100%的出愈率;通过对CA与抗褐变剂(包括聚乙烯吡咯烷酮、植酸,维生素C)效果的比较,得出0.1%LCA抗褐变效果最好,且愈伤组织的增殖培数最多,外观颜色鲜艳。4.通过对离体叶柄再生不定芽的研究,基本确定Nubiana李叶柄再生不定芽较适宜的培养基及其植物生长调节剂组合是:WPM+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。在叶柄处有少量的不定芽的产生,再生频率约为3.3%。
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