研究背景与目的:骨肉瘤(osteosarcoma)作为目前世界上患者死亡率较高的恶性肿瘤之一,死亡率约占其主要发病群体-青少年的恶性肿瘤中的58%。随着现代手术结合术后化疗等治疗方式的使用和改进,尽管5年生存率有所提高,仍旧低于58%。相关肿瘤基因的表达改变长伴随在骨肉瘤细胞在发生基因表达突变的过程中,减弱骨巨细瘤向外迁徙、避免术后再发的关键方法之一就是探索其恶变能力的内在生物机制,。CHI3L1基因被发现在人类染色体中位于1 q31-q32,其基因组长度大概在10.9kb,共有10个外显子,人体的大部分组织如脂肪、骨骼等反转录DNA库的均有CH13L1基因存在。几丁质酶样蛋白(Chitinase-like protein,YKL-40)是其基因编码产物,近几年研究报道表明,该蛋白参与了多种肿瘤的增殖、浸润、血管形成和侵袭转移等重要过程。近年间对骨肉瘤这一恶性程度很高的肿瘤的相关研究一直都未曾间断,而研究CHI3L1基因在骨肉瘤中表达的相关内容很少,且都存在各自的局限性。本文的目的是探寻CHI3L1在骨肉瘤中的表达情况及其发挥的作用,争取为骨肉瘤的早期诊断提供一个基因角度的标准,以及为可能在未来施行的分子靶向治疗和遗传信息治疗提供参考依据。此次研究中,主要研究目的是获得CHI3L1基因在骨肉瘤细胞中的表达情况,然后是提高CHI3L1基因的表达对骨肉瘤细胞的影响。实验分两部分,第一部分是检测基因在人活体骨肉瘤标本中的表达情况;同时检测CHI3L1在人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS中和人骨松质细胞在mRNA及蛋白方面表达的区别。第三部分为通过构建过表达CHI3L1基因的骨肉瘤细胞模型来对比其与正常骨肉瘤细胞在体外迁移、修复能力和体外凋亡情况等方面的差异。方法：第一部分实验:随机取3例骨肉瘤及同一患者正常松质骨组织抽提总RNA,通过基因芯片分析寻找差异显著mRNA(CHI3L1);然后通过实时荧光定量PCR、荧光原位杂交的方法进一步明确21例骨肉瘤及相应瘤旁组织在中CHI3L1的表达。第二部分实验:以人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS及人的正常骨松质细胞为研究对象,利用RT-PCR及Western-blot检测不同细胞株中CHI3L1基因的转录mRNA及其后续表达蛋白的差异。再令Transwell实验、CCK8细胞计数实验、流式细胞学分析检测干预CHI3L1后MG63、U2OS的增殖活性及细胞周期。结果:1、基因芯片结果显示骨肉瘤中CHI3L1表达有明显减少;实时荧光定量PCR、荧光原位杂交检测结果显示20例骨肉瘤中CHI3L1基因的表达较肿瘤旁正常组织显著减少;2、CHI3L1基因在人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS中表达减少,相应蛋白表达也减少。3、在MG63、U2OS中转染pcDNA3.1/CHI3L1融合质粒可以减缓细胞周期,促进细胞的凋亡。结论:1、CHI3L1基因在人骨肉瘤细胞中的表达量是减少的;2、CHI3L1是做为抑癌基因在骨肉瘤中表达并发挥作用的。