目的:利用大鼠心肌缺血再灌注损伤模型研究苗岭纳豆素胶囊对其的影响及其可能的作用机制;测定苗岭纳豆素胶囊中主要活性成分的含量。方法:1.选取健康雄性SD大鼠90只,随机分假手术组,心肌缺血再灌注模型组,阳性药物普萘洛尔组,苗岭纳豆素胶囊高、中、低剂量组。在体结扎大鼠冠状动脉左前降支造成心肌缺血,30 min后松开结扎线实现血流灌注180min制备心肌缺血再灌注模型。(1)采用泰盟BL-420S生物机能实验信号采集系统记录各组的心电图,以此判断模型是否建立成功,同时记录心率及统计ST段、T波电位值的变化值,观察比较各组心电图和心率的差别;(2)用TTC染色和HE染色的方法观察心肌梗死面积和梗死细胞的形态;(3)测定心肌缺血再灌注大鼠血清中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、以及肌钙蛋白I(cTnI)等心肌酶或特异性指标。(4)测定心肌缺血再灌注大鼠血清中超氧化歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平。2.(1)采用纤维蛋白平板法测定苗岭纳豆素胶囊的纤溶酶含量;(2)采用UV法测定其大豆总黄酮的含量;(3)HPLC法确定其中含有大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素等化合物;(4)苯酚-硫酸比色法测定其大豆多糖的含量;(5)香草醛-高氯酸比色法测定其大豆皂苷的含量。结果:1.苗岭纳豆素胶囊对心肌缺血再灌注大鼠的影响:(1)与假手术组比较,模型组心率在缺血时期心率明显增加(P<0.05),解开结扎线后心率差异不大,无统计学意义。与模型组比较,苗岭纳豆素胶囊高、中、低剂量组心率比较无统计学意义。(2)与模型组比较,苗岭纳豆素胶囊高、中、低剂量组在缺血时期降低ST段和T波,差异有统计学意义(P<0.05),再灌注时期差异无统计学意义(P>0.05)。(3)与假手术组比较,模型组心肌梗死面积明显增加(P<0.001);与模型组比较,苗岭纳豆素胶囊各剂量组大鼠心肌梗死范围均出现明显的降低,具有统计学差异(p<0.001)。(4)在光镜下观察,模型组可见肌纤维断裂,紊乱,局部横纹不清或者消失,心肌细胞间隙增宽,出现萎缩现象,核固缩,破裂。部分心肌间质存在炎症细胞浸润。苗岭纳豆素胶囊组心肌纤维排列紧密,可见少量细胞核破碎与溶解,细胞间轻微水肿,心肌细胞体积轻度增加,但较模型组减轻。(5)苗岭纳豆素胶囊高、中、低剂量组能明显降低LDH、CK-MB活性(P<0.05),对于AST活性,苗岭纳豆素胶囊高剂量组能显著降低其活性(P<0.05),对于cTnI含量,苗岭纳豆素胶囊低剂量无显著差异(P>0.05)。(6)与模型组比较,苗岭纳豆素胶囊各剂量组能明显提高SOD活性,降低MDA含量(P<0.05),对于与TNF-α含量,苗岭纳豆素胶囊高剂量组能显著降低其含量(P<0.05)。2.主要活性物质含量测定:采用纤维蛋白平板法测定苗岭纳豆素胶囊溶栓酶活性为:3406.01IU/g;UV测定大豆异黄酮含量为:4.80mg/g;HPLC法对大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素等4种大豆异黄酮进行含量测定分别为:大豆苷0.644mg/g,染料木苷0.733mg/g,大豆苷元0.213mg/g,染料木素0.095mg/g;硫酸-苯酚法测定大豆多糖为:6.38mg/g;香草醛-高氯酸比色法大豆皂苷的含量为:17.18mg/g。结论:1.通过该实验研究发现苗岭纳豆素胶囊对心肌缺血再灌注损伤大鼠心率无明显改变,能显著降低ST段和T波抬高幅度,缩小梗死面积,能减轻心肌间水肿,改善心肌纤维排列紊乱状况,能显著降低AST、LDH、CK-MB等心肌酶的活性,降低cTnI含量,实验结果提示该药物对心肌缺血再灌注损伤有一定的治疗作用。2.研究发现苗岭纳豆素胶囊能提高SOD活性,降低MDA和TNF-α含量,其作用的机制可能是抑制自由基的产生、增强自由基清除剂的功能、维持心肌细胞氧化和抗氧化的动态平衡;减少炎性细胞的生成,抑制炎症反应发挥保护作用。3.本实验测定苗岭纳豆素胶囊中主要活性物质,并且同时采用HPLC测定大豆异黄酮的含量,为苗岭纳豆素胶囊在心肌缺血再灌注损伤的保护作用提供物质基础。