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【目的】研究回生口服液经miR-200b/ZEB-1信号环路调控肺癌细胞上皮-间质转化(e pithelial-mesenchymal transition,EMT)促进肺癌康复的机制,为制定中医药治疗肺癌新方案及抗肿瘤新药开发提供实验依据。【方法】1.体外培养Lewis肺癌细胞,分别经回生口服液、顺铂、回生口服液+顺铂含药血清干预后,利用流式细胞技术,观察Lewis肺癌细胞的周期变化。2.将56只健康C57BL/6J小鼠按随机数字表分为4组,每组14只,分别为模型组、顺铂组、回生口服液组、联合用药组(回生口服液+顺铂),于小鼠右腋皮下注射Lewis肺癌细胞混悬液建立Lewis小鼠肺癌模型。造模成功后,对各组实验小鼠进行干预,回生口服液组予回生口服液灌胃,顺铂组予顺铂腹腔注射,联合用药组予回生口服液灌胃+顺铂腹腔注射联合治疗,模型组予生理盐水灌胃。干预2周后颈椎脱臼处死小鼠,剥离肿瘤于透射电子显微镜下观察肺癌细胞超微结构。3.应用RT-PCR技术检测肺癌细胞miR-200b基因表达,Western Blot方法检测肺癌细胞ZEB-1、E-cadherin、Vimentin蛋白表达。【结果】1.回生口服液对Lewis肺癌细胞周期的影响与对照组相比,回生口服液组、顺铂组、联合用药组Lewis肺癌G1期细胞数量比例明显升高,S期、G2期细胞数量比例明显减少(P<0.05)。回生口服液组、顺铂组、联合用药组组间比较,Lewis肺癌细胞G1期数量比例升高、S期数量比例减少程度依次为:顺铂组>联合用药组>回生口服液组(P<0.05)。2.回生口服液对Lewis肺癌细胞超微结构的影响模型组肺癌细胞结构完整,与周围细胞有紧密连接,细胞内染色质均匀,核浆比例增大,核异型程度高,细胞器未见肿大、损伤。回生口服液组:肺癌细胞结构尚清晰,细胞体积明显缩小,核形不规则,核内染色质碎裂、边集,分布在核膜内侧,胞质内可见线粒体空泡样变性。顺铂组:肺癌细胞结构尚清晰,核形不规则,核内染色质边集,可见线粒体空泡样变性及凋亡小体形成。联合用药组:肺癌细胞凋亡现象多见,细胞膜结构不完整,核内染色质碎裂,呈密集分布,可见线粒体空泡样变性以及自噬体形成。3.回生口服液对肺癌细胞miR-200b表达的影响与模型组相比,回生口服液组、联合用药组miR-200b表达明显升高(P<0.05),顺铂组与模型组无统计学差异(P>0.05);回生口服液组、顺铂组、联合用药组组间比较,回生口服液组miR-200b表达明显高于联合用药组、顺铂组(P<0.05)。联合用药组miR-200b表达明显高于顺铂组(P<0.05)。miR-200b表达由高到低依次为:回生口服液组>联合用药组>顺铂组(P<0.05)。4.回生口服液对肺癌细胞ZEB-1蛋白、E-cadherin蛋白、Vimentin蛋白表达的影响(1)ZEB-1蛋白表达:与模型组相比,回生口服液组、顺铂组及联合用药组ZEB-1表达明显降低(P<0.05);各治疗组组间比较,ZEB-1表达由高到低依次为:回生口服液组>顺铂组>联合用药组(P<0.05)。(2)E-cadherin蛋白表达:与模型组相比,回生口服液组、顺铂组及联合用药组E-cadherin表达明显升高(P<0.05);各治疗组组间比较,E-cadherin表达由高到低依次为:联合用药组>顺铂组/回生口服液组(P<0.05)。(3)Vimentin蛋白表达:与模型组相比,回生口服液组、顺铂组及联合用药组Vimentin表达明显降低(P<0.05);各治疗组组间比较,Vimentin表达由高到低依次为:回生口服液组>顺铂组>联合用药组(P<0.05)。【结论】1.回生口服液可诱导Lewis肺癌细胞周期停滞于G1期,明显抑制Lewis肺癌细胞生长。2.联合用药组在抑制肺癌细胞EMT进程上,较单独应用回生口服液或顺铂效果更佳。3.回生口服液可经miR-200b/ZEB-1信号环路,抑制肺癌细胞EMT,这可能是回生口服液治疗肺癌的作用机制之一。