宽叶独行菜绿原酸提取优化及其与甘蓝型油菜原生质体融合

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目的研究宽叶独行菜的经济价值,探讨绿原酸的提取工艺条件;将甘蓝型油菜和宽叶独行菜进行体细胞杂交,培育出具有优良性状的杂种植株,从而实现对油菜的遗传改良。方法通过单因素试验对乙醇浓度、材料粒度、液料比及超声功率等工艺参数进行研究,并通过响应面法优化提取工艺,建立宽叶独行菜绿原酸提取得率的多元二次回归方程;利用PEG-高Ca2+、高p H诱导融合的方法,将油菜叶肉细胞原生质体同宽叶独行菜叶肉细胞原生质体进行不对称融合,然后依次在Pell B固液双层培养基、Pell C扩增培养基、Pell E生根培养基和MS培养基中进行培养。培育出杂种植株后对其进行形态学和细胞学鉴定。结果单因素和响应面优化绿原酸提取的最优参数为:乙醇浓度80%,材料粒度40目,液料比50:1,超声功率200W,在此实验条件下绿原酸取得率的理论值为0.796%,实际验证值为0.712%。通过在一系列不同培养基中进行培养,并对实验中各条件因素的调控,最终获得了结合了双亲性状的杂种植株。结论宽叶独行菜具有很高的经济利用价值,可以作为绿原酸的提取原材料;将甘蓝型油菜与宽叶独行菜进行杂交,可以使油菜获得优良的性状。
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