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目的:运用血清学蛋白质组分析方法寻找乳腺癌相关抗原。 方法:体外培养乳腺癌T-47D细胞，提取细胞总蛋白;T-47D细胞总蛋白经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离后转膜，用对照血清和患者血清作为一抗进行蛋白质印迹(Western blot)分析，寻找差异反应蛋白条带;T-47D细胞总蛋白经双向电泳技术(2-DE)分离后转膜，分别用20例对照血清和20例患者血清作为一抗进行Western blot分析，将每一个蛋白点与对照血清和患者血清发生免疫反应的频率进行统计学分析，找出具有显著性差异的蛋白质点，该蛋白点用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析鉴定，并经NCBI数据库检索。 结果:SDS-PAGE的Western blot结果显示T-47D细胞总蛋白与患者血清反应的蛋白分子量在22kDa-94kDa的范围内;对T-47D细胞总蛋白进行3次双向电泳重复性实验，获得了分辨率高、重复性好的双向电泳图谱，蛋白质点主要集中在分子量为20.0kDa-94kDa和等电点pI4.0-7.0的范围内;筛选出10个差异蛋白点，经质谱鉴定为HSP90、HSP60、HSP27、ER-60、PGAM1、P4HB、EEF1G、核糖体蛋白P0、hypothetical protein和unnamed protein product。 结论:乳腺癌患者血清中的抗体表达水平发生改变;筛选出的10个差异表达的蛋白分别涉及到分子伴侣、能量代谢、细胞信号等多种功能相关的蛋白质，这可能为进一步了解乳腺癌发生发展的分子机制提供一定的实验基础。