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研究背景和意义子宫颈癌(cervical cancer)是常见的女性恶性肿瘤,其全球发病率仅次于乳腺癌,近年来子宫颈癌的发病呈现年轻化的趋势,严重威胁女性的健康和生命。现有的预防治疗手段中,宫颈癌的疫苗已经上市可以进行早期预防,手术切除、放疗和辅助化疗等治疗方式也取得了巨大的进步。然而有很多患者被发现时已经处于中、晚期,原本有效的治疗方法变得效果不佳或无效。因此,迫切需要探索一种有效的肿瘤标志物用于早期诊断及改进治疗策略。肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(TNFAIP8或TIPE)是最近发现的一种癌基因,也被称做GG2-1,SCC-S2,MDC-3.13。TIPE在多种癌症中高表达,并且参与了肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制了肿瘤细胞的凋亡以及降低了肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。有研究表明,在女性肿瘤中,TIPE高表达于子宫内膜癌,并且在子宫内膜癌的发展中TIPE还与基质金属蛋白酶-9及增殖性抗原Ki-67的表达高度相关。在卵巢癌中,TIPE与肿瘤的临床病理特征和预后有一定相关性,但其在子宫颈癌中的表达和参与调节子宫颈细胞的生长、侵袭及迁移的机制尚未确定。所以研究TIPE对子宫颈癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响及确切的机制,发现和找出一个新的干预靶点,对子宫颈癌的治疗和改善病人预后有着重要的意义。研究目的探讨TIPE对子宫颈癌细胞的增殖、浸润、转移及凋亡的影响及相关机制,为子宫颈癌的早期临床诊断和靶向治疗提供依据。研究方法运用免疫组化技术测定临床病例的癌组织和癌旁组织中TIPE的表达量,分析TIPE在癌组织和癌旁组织中的表达差异。敲除HeLa、C-33A、SiHa三种子宫颈癌细胞中的TIPE基因,通过嘌呤霉素筛选获得稳定细胞株。运用MTS实验技术检测TIPE对子宫颈癌细胞增殖能力的影响;通过划痕实验与Transwell实验分析TIPE对子宫颈癌细胞迁移能力的影响;用Matrigel实验分析TIPE对子宫颈癌细胞侵袭能力的影响;通过TUNEL实验和流式细胞术检测TIPE对子宫颈癌细胞凋亡能力的影响;Western Blot检测TNFR1受体信号通路中相关凋亡蛋白的表达。建立荷瘤小鼠模型,分析敲低TIPE对子宫颈癌细胞在裸鼠体内成瘤的影响。结果免疫组化测定结果显示,子宫颈的癌旁组织中TIPE表达水平低于癌组织。敲低子宫颈癌HeLa、C-33A、SiHa细胞系中TIPE的表达,MTS结果显示敲低组细胞增殖能力显著低于对照组细胞;从划痕、Transwell、Matrigel的实验结果以及结合相关侵袭蛋白MMP2、MMP9的检测水平,可以看出敲低TIPE能够明显降低子宫颈癌细胞HeLa、C-33A、SiHa的迁移、侵袭能力;TUNEL实验和流式检测结果显示,敲除TIPE的子宫颈癌细胞的抗凋亡能力低于对照组细胞。此外,Western Blot结果显示,TNFR1通路中调控凋亡的相关蛋白如FADD、casepase3、casepase9、p-JNK、Bax等蛋白表达增加;SiHa细胞在裸鼠皮下成瘤显示敲低TNFAIP8降低了裸鼠瘤体的生长速度和瘤体的大小。结论肿瘤坏死因子α诱导的蛋白8(TIPE)促进子宫颈癌细胞的增殖、浸润转移,抑制其凋亡。