基于新型基底的酶电极的构建与直接电化学研究

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基于氧化还原酶与电极之间的直接电子转移建立起来的电化学生物传感器具有灵敏度高、选择性好等特点,在生物医学诊断、环境监测等领域具有潜在应用价值。为实现酶与电极之间的直接电子转移,提高直接电子转移效率,获得高性能的电化学生物传感器,酶在电极上高的表面覆盖量,酶的生物活性与电化学活性的保持,以及恰当的取向是制约该类生物传感器性能提高的关键因素。本论文试图从酶的生物活性和电活性角度出发,构建两种适宜于酶活性保持的固载材料,研究固定化酶的直接电化学和电催化性能。具体研究内容包括:1、小分子凝胶固定辣根过氧化物酶先前研究表明,溴化十二烷基吡啶、丙酮和水三元体系在适当的比例下可以自发形成凝胶,并且此凝胶在疏水性离子液体1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐中是不溶胀的。基于这一现象,本文首次用该小分子凝胶将辣根过氧化物酶固定到玻碳电极上,制备了酶电极。该酶电极在1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐中的循环伏安曲线有一对峰形很好的准可逆的氧化还原峰,并且辣根过氧化物酶与电极之间的直接电子转移速率达到14.4s-1,这表明辣根过氧化物酶与玻碳电极之间实现了很好的直接电子转移。此外,该酶电极对三氯乙酸有良好的电催化还原作用,且具有良好的稳定性和重现性。2、离子液体碳糊电极包埋葡萄糖氧化酶将N-辛基吡啶六氟磷酸盐与石墨粉混合后,制备了离子液体碳糊电极。通过滴涂的方法将适量的葡萄糖氧化酶用Nafion固定到离子液体碳糊电极上,制备了葡萄糖氧化酶电极。此酶电极在磷酸盐缓冲溶液中的的氧化还原峰电势分别为-0.358V和-0.402V,并且葡萄糖氧化酶与电极之间的直接电子转移速率达到2.34s-1,这表明葡萄糖氧化酶与电极之间的电子转移速率较快。此外,该酶电极对葡萄糖有电催化响应,且具有良好的稳定性与重现性。
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