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【目的】
主要研究脂氧素(lipoxinA4，LXA4)对脂多糖(LPS)刺激的滋养细胞氧化损伤的保护作用及作用机制。
【方法】
细胞实验分为4组：(1)对照组，(2)LPS组：10μg/mlLPS作用24h(3)LPS+100nmol/LLXA4组：10μg/mlLPS+100nmol/LLXA4作用24h(4)LPS+200nmol/LLXA4组：10μg/mlLPS+200nmol/LLXA4作用24h。以2，7二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针检测细胞内活性氧(Reactiveoxygenspecies，ROS)水平；细胞免疫荧光检测转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)转位变化；Western-blot检测滋养细胞胞核、胞质中Nrf2蛋白的表达；RT-PCR检测Nrf2下游抗氧化酶mRNA的表达；黄嘌呤氧化酶法检测细胞上清SOD的含量；酶偶联法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX，GPX)的活力。
【结果】
1.ROS的检测：LPS组滋养细胞内DCF密度值为(77.00±5.83)，与对照组(53.00±3.08)相比，LPS组滋养细胞内ROS水平明显升高（P＜0.01），使用100nmol/L、200nmol/LLXA4干预后，细胞内ROS水平均明显下降，DCF密度值分别下降至(62.00±3.39、55.00±4.30，P＜0.01)；
2．细胞免疫荧光结果显示：LPS组Nrf2主要在胞质中表达。而加入LXA4干预后胞核可见较强的Nrf2的表达；其中加入200nmol/LLXA4作用后胞核中的Nrf2的表达明显增强(P＜0.01)。
3．Western-blot结果显示：与对照组相比，LPS组滋养细胞胞核中Nrf2蛋白水平明显下降(P＜0.01)，胞质中Nrf2蛋白水平明显上调（P＜0.01），使用100nmol/L、200nmol/LLXA4干预后滋养细胞胞核中的Nrf2蛋白水平均上升(P＜0.05、P＜0.01)，胞质中Nrf2蛋白水平均明显下降(P＜0.01)。
4．RT-PCR结果显示：LPS组HO-1、SOD、GPXmRNA表达水平明显低于对照组（P＜0.01），使用100nmol/LLXA4干预后HO-1、SOD、GPXmRNA表达水平均高于LPS组(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01)，而LPS+100nmol/LLXA4组与LPS+200nmol/LLXA4组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。
5．黄嘌呤氧化酶法结果显示：LPS组滋养细胞上清液中的SOD含量为(4.77±0.34)U/ml，与对照组(9.21±0.74)U/ml相比明显下降（P＜0.01），给予100nmol/L、200nmol/LLXA4干预后，均能明显增加SOD含量，酶活力分别上升至(8.93±0.53、16.74±0.64)U/ml(P＜0.01)。
6．酶偶联法结果显示：LPS组滋养细胞裂解液中GPX含量为(8.65±0.62)U/g蛋白质，与对照组(14.87±0.35)U/g蛋白质相比明显减少(P＜0.01)，给予不同浓度的LXA4干预后，均能显著增加GSH-PX含量(P＜0.01)，其中200nmol/LLXA4作用最为明显；酶活力上升至(16.97±0.48)U/g蛋白质(P＜0.01)。
【结论】
脂氧素通过活化转录因子Nrf2来促进多种抗氧化酶和Ⅱ相酶的表达来清除ROS，进而减轻滋养细胞的氧化损伤。