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[目的]1.观察RhoA、ROCK1蛋白在压力超负荷大鼠心肌中的表达,探讨RhoA/ROCK信号通路与压力超负荷大鼠心肌纤维化的关系。2.观察丹参酮ⅡA (Tan Ⅱ A)对心肌组织RhoA、ROCK1蛋白的表达,促纤维化物质心肌转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、核因子-κB pP65(NF-κB P65)和血清肿瘤坏死因子-α (TNF-α)含量的干预作用,探讨Tan ⅡA对压力超负荷大鼠心肌纤维化的影响及其可能机制。[方法]1.60只雄性SD大鼠随机选取8只,作为假手术组(Sham组),将其余的52只大鼠进行肾上方腹主动脉缩窄术,4周后将存活的造模组32只大鼠随机分为4组(n=8),即模型组(Model组)、Tan ⅡA低剂量组(L-Tan ⅡA组)、Tan ⅡA高剂量组(H-Tan ⅡA组)及阳性对照药物卡托普利组(Captopril组)。L-Tan Ⅱ A组,丹参酮ⅡA磺酸钠注射剂10mg/kg/d,腹腔注射,1/日；H-Tan Ⅱ A组,丹参酮ⅡA磺酸钠注射剂20mg/kg/d,腹腔注射,1/日；Captopril组,卡托普利100mg/kg/d,灌胃,1/日；Sham组、Model组均以生理盐水,4ml/kg/d,腹腔注射,1/日。连续给予4周。2.8周后,将动物处死后,准确秤取体质量(BW)、心脏质量(HW)、左心室质量(LVW),分别计算心脏质量指数(HWI)=(HW/BW)和左心室质量指数(LVWI)=(LVW/BW),以HWI和LVWI作为判断心肌肥厚的指标。HE染色和Masson染色检测心肌组织形态学改变和胶原沉积情况,ELISA法检测心肌羟脯氨酸含量,免疫组化和免疫印迹法检测心肌RhoA和ROCK1蛋白的含量,免疫组化法检测心肌TGF-β1、CTGF、NF-κB p65含量以及ELISA法检测血清TNF-α含量。[结果]1.心脏质量指数(HWI)和左心室质量指数(LVWI)与Sham组比较,Model组的HWI和LVWI均明显增大(P<0.01)；与Model组比较,L-Tan ⅡA组的HWI和LVWI均下降(P<0.05)；而H-Tan ⅡA组和Captopril组的HWI和LVWI下降更明显(P<0.01)。2.心肌组织形态学改变HE染色显示：Sham组大鼠心肌纤维排列整齐,横纹明显,胞核清晰,无细胞肿胀,心肌间质及微血管结果正常；Model组大鼠心肌纤维明显增粗,排列紊乱,部分心肌细胞水肿,横纹模糊,偶见心肌断裂,肌束间隙增大,胞核固缩,间质可见炎症细胞浸润；L-Tan ⅡA组、H-Tan ⅡA组和Captopril组均有不用程度改善。Masson染色显示：胶原纤维呈蓝色,心肌细胞呈红色。与Sham组比较,Model组胶原沉积明显增加,L-Tan ⅡA组、H-TanⅡA组和Captopril组胶原沉积均有不用程度减轻。3.大鼠心肌羟脯氨酸(HYP)含量与Sham组比较,Model组心肌HYP含量明显增高(P<0.01)；与Model组比较,L-Tan ⅡA组HYP含量降低(P<0.05),而H-Tan ⅡA组和Captopril组下降更明显(P<0.01)。4.心肌TGF-β1的表达与Sham组比较,Model组心肌TGF-β1蛋白表达水平明显增高(P<0.01)。与Model组比较,L-Tan ⅡA组TGF-β1蛋白表达水平降低(P<0.05),而H-Tan Ⅱ A组和Captopril组下降更明显(P<0.01)。5.心肌CTGF的表达与Sham组比较,Model组心肌CTGF蛋白表达水平明显增高(P<0.01)。与Model组比较,L-Tan ⅡA组CTGF蛋白表达水平降低(P<0.05),而H-Tan Ⅱ A组和Captopril组下降更明显(P<0.01)。6.心肌NF-κB p65的表达与Sham组比较,Model组心肌NF-κB p65蛋白表达水平明显增高(P<0.01)。与Model组比较,L-Tan ⅡA组NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05),而H-Tan ⅡA组和Captopril组下降更明显(P<0.01)。7.血清TNF-α的表达与Sham组比较,Model组血清TNF-α水平明显增高(P<0.01)；与Model组比较,L-Tan ⅡA组TNF-α表达水平降低(P<0.05),而H-Tan Ⅱ A组和Captopril组下降更明显(P<0.01)。8.心肌RhoA、ROCK1蛋白的表达Western Blot检测显示,与Sham组比较,Model组心肌RhoA、ROCK1蛋白表达水平增高(P<0.01)。与Model组比较,L-Tan ⅡA组RhoA、ROCK1蛋白表达水平降低(P<0.05),而H-Tan Ⅱ A组和Captopril组下降更明显(P<0.01)。免疫组化染色显示其变化与Western Blot检测的趋势一致。[结论]1.RhoA/ROCK信号通路可能与压力超负荷大鼠心肌纤维化的发生发展关系密切。2.促纤维化细胞因子(TGF-β1、CTGF)和促炎细胞因子(NF-κB、TNF-α)在心肌纤维化发生发展中可能发挥着重要作用。3. Tan ⅡA可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路活性,下调促纤维化细胞因子和促炎细胞因子表达,减轻心肌纤维化。