【摘 要】
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安祖花终年开花,且花枝独特,是极具价值的观花观叶植物。但在栽培过程中,常常受到病虫的危害,严重影响其产量和质量。利用农杆菌把植物系统获得性抗性的关键调节基因NPR1 转
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安祖花终年开花,且花枝独特,是极具价值的观花观叶植物。但在栽培过程中,常常受到病虫的危害,严重影响其产量和质量。利用农杆菌把植物系统获得性抗性的关键调节基因NPR1 转化安祖花,以获得抗性转基因植株,具有重大的现实意义和经济意义。以安祖花顶芽为外植体诱导愈伤组织,并通过不同切割方式的实验建立了从愈伤组织在短期内得到大量优质再生苗的组培体系。为转化提供了良好的再生体系。通过安祖花愈伤组织和芽对不同种类和浓度抗生素敏感性实验,确定了愈伤组织和芽筛选抗生素的种类和浓度为:潮霉素50mg/L,头孢霉素500mg/L。以愈伤组织为外植体,通过根癌农杆菌LBA4404 介导,将构建于质粒PCAMBIA1301 的NPR1 基因转化安祖花,并对转化条件进行了一系列的优化:愈伤组织预培养3 天,23℃时农杆菌菌液浸染20min,不用无菌水清洗与农杆菌共培养5 天。实验结果,最终得到了7 株抗性再生植株,经PCR 检测7 株再生苗均为转基因植株。研究结果表明NPR1 基因利用农杆菌介导转化安祖花可以使安祖花获得具广谱抗性的种质资源。
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