新疆小檗属植物花色苷色素的分离鉴定及生物活性研究

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本文以南疆地区生长的小檗属植物——喀什小檗、红叶小檗和黑果小檗的果实为原材料,应用传统和现代相结合方法对三种果实中所含花色苷组分进行分析与鉴定,同时对三种果实中花色苷的生物活性进行研究。本实验采用溶剂超声波法提取花色苷,用D101型大孔吸附树脂进行纯化得到精制花色苷。采用光谱法和纸色谱法相结合的方法,对这三种果实中的花色苷提取液进行初步鉴定。结果表明:喀什小檗中含有牵牛花色素、矢车菊色素、飞燕草色素,红叶小檗色素中可能含有天竺葵色素、锦葵色素,黑果小檗色素中可能含有矢车菊色素和天竺葵色素,均为3位上连接的葡萄糖或半乳糖。应用液质联用技术,采用质谱全扫描,母离子扫描,子离子扫描对三种果实中的花色苷进行分离和鉴定。结果表明:喀什小檗中可能含有飞燕草-3-半乳糖苷、飞燕草-3-葡萄糖苷、矢车菊-3-半乳糖苷、矢车菊-3-葡萄糖苷、芍药-3-葡萄糖苷、芍药-3-半乳糖苷、牵牛花-3-葡萄糖苷、锦葵-3-半乳糖苷、锦葵-3-葡萄糖苷;红叶小檗中可能含有芍药色素-3-半乳糖苷、芍药色素-3-葡萄糖苷、矢车菊-3-葡萄糖苷;黑果小檗中可能含有矢车菊-3-半乳糖苷、矢车菊-3-葡萄糖苷,天竺葵色素-3-葡萄糖苷。应用红外吸收光谱技术,采用溴化钾压片法,将三种果实中花色苷红外光谱与标准的图谱比较,他们结构相似,都含有苯环,含氧杂环,甲氧基,糖和羟基的结构。采用pH示差法和Folin Ciocalteu比色法分别测定三种果实中的花色苷和多酚的含量。结果表明:喀什小檗粗品花色素含量为777.6mg/100g;D-101大孔树脂纯化喀什小檗色素花色素含量为102.2mg/100g;红叶小檗粗品花色素含量为1478.5mg/100g;D-101大孔树脂纯化红叶小檗色素花色素含量为411.7mg/100g;黑果小檗粗品花色素含量为78.05mg/100g;D-101大孔树脂纯化黑果小檗色素花色素含量为12.69mg/100g。喀什小檗粗品多酚含量为443.29mg/100g;D-101大孔树脂纯化喀什小檗色素多酚含量为113.14mg/100g;红叶小檗粗品多酚含量为150.42mg/100g;D-101大孔树脂纯化红叶小檗色素多酚含量为29.77mg/100g;黑果小檗粗品多酚含量为154.35mg/100g;D-101大孔树脂纯化黑果小檗色素多酚含量为27.89mg/100g。实验以Trolox为对照,采用·DPPH和ABTS+体外抗氧化模型对三种果实中的花色苷进行研究。结果表明:与Trolox相比,·DPPH清除能力:Trolox>D101纯化黑果小檗色素>喀什小檗粗提物>D101纯化红叶小檗色素>D101纯化喀什小檗色素>红叶小檗粗提物>黑果小檗粗提物;ABTS+清除能力:D101纯化黑果小檗色素>D101纯化红叶小檗色素>Trolox>黑果小檗粗提物>红叶小檗粗提物>喀什小檗粗提物>D101纯化喀什小檗色素。应用X-射线对斑马鱼胚胎的损伤,研究红叶小檗对其的抗辐射作用。通过记录X-射线损伤斑马鱼胚胎的死亡率和畸形率,以及生化指标的测定(ROS,MDA和SOD)。结果表明:红叶小檗色素对斑马鱼胚胎的损伤具有保护作用,其机制可能与红叶小檗色素提高斑马鱼胚SOD活性,减少氧自由基的产生有关。
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