反义RNA技术构建瑞氏木霉木糖醇生产菌及瑞氏木霉线粒体NADH脱氢酶基因克隆与序列分析

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瑞氏木霉(trichodermareesei)是自然界中普遍存在并有重要经济意义的一种丝状真菌.木糖醇是木糖代谢过程中的一个中间产物,作为非糖植物甜分有多方面的生理作用,其市场应用潜力巨大,构建木糖醇生产菌株,采用发酵法直接利用天然光纤维素生产木糖醇,具有成本低、无污染等多种优点.随着天然反义RNA的普遍发现以及对它们的结构特征、作用机理和功能效应的深入研究,启发了人们利用反义RNA抑制特定基因表达的特征,发展了多项反义RNA技术.将瑞氏木霉木糖醇脱氢酶基因(xdh)DNA序列反向插入丝状真菌表达载体pGT的启动子和终止子序列之间,构建了xdh反义RNA表达载体pGTA-xdh.结粒体NADH脱氢酶经常被称为复合体I,是电子传递链中一个重要的的组分,现氏木霉作为一种重要的工业生产菌株,从分子水平对其重的生理遗传特性进行研究提十分必要的.该研究克隆了瑞氏木霉素线粒体NADH脱氢酶亚基II和III的编码基因ND2、ND3以及紧密相连的7个tRNA基因,并对它们的序列进行了分析.
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