目的:(1)人肾小球系膜细胞的原代培养.(2)探讨高糖对人肾小球系膜细胞和内皮细胞的影响及在高糖环境下两种细胞的相互作用.(3)研究茶多酚对糖尿病肾病的防治作用.方法:(1)按Mackay改良方法培养和鉴定人肾小球系膜细胞.(2)采用双层共同培养法建立系膜细胞和内皮细胞细胞相互作用研究模型,分为空白对照组、高糖组、茶多酚干预组、茶多酚对照组,并与两种细胞分别单独培养进行比较,培养0、12、36小时后,用分光光度比色法、放射免疫法及RT-PCR方法观察超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、Ⅳ型胶原和转化生长因子-β<,1>(TGF-β<,1>)的表达情况.结论:(1)培养的细胞为人肾小球系膜细胞.(2)建立系膜细胞与内皮细胞双层共同培养模型,与普通单层单独培养相比可以更好地反映糖尿病肾病时肾小球内部的病理生理过程.(3)高糖可使肾小球系膜细胞、内皮细胞SOD活性下降、MDA含量、Ⅳ型胶原分泌增加并使TGF-β<,1>mRNA表达增加.(4)在正常培养条件下,肾小球系膜细胞和内皮细胞在活性氧方面无明显相互作用.(5)在高糖环境下,系膜细胞和内皮细胞相互作用,互相促进,共同参与了糖尿病肾病的发生和发展.(6)茶多酚通过干预系膜细胞与内皮细胞的相互作用,而对糖尿病肾病有明确的防治作用.