【摘 要】
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目的:研究紫草素对核因子κB受体活化因子配体所诱导的破骨细胞生成及破骨相关基因m RNA表达水平的影响。方法:1)使用CCK-8法检测不同浓度的紫草素（0、0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2μmol/L）对RAW264.7细胞的毒性,筛选出安全浓度;2)使用不同浓度（0、30、50、100μg/L）的核因子κB受体活化因子配体,诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,通过抗酒石酸酸
【基金项目】
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口腔疾病研究国家重点实验室基金资助项目（SKLOD2021OF04）；
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目的:研究紫草素对核因子κB受体活化因子配体所诱导的破骨细胞生成及破骨相关基因m RNA表达水平的影响。方法:1)使用CCK-8法检测不同浓度的紫草素（0、0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2μmol/L）对RAW264.7细胞的毒性,筛选出安全浓度;2)使用不同浓度（0、30、50、100μg/L）的核因子κB受体活化因子配体,诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色实验,来观察破骨细胞的数目,从而筛选出最佳核因子κB受体活化因子配体浓度;3)给予最佳浓度的核因子κB受体活化因子配体,和不同安全浓度的紫草素干预后,可以通过使用抗酒石酸酸性磷酸酶染色,观察破骨细胞的数量。以及用抗酒石酸酸性磷酸酶活性检测试剂盒,检测破骨细胞中的酶活性水平;4)通过实时定量PCR技术检测破骨细胞标志性表达的基因:基质金属蛋白酶9、活化T细胞核因子1、组织蛋白酶K、原癌基因c-Fos和核因子κB受体活化因子m RNA表达。结果:1)高于0.5μmol/L的紫草素显著抑制RAW264.7细胞的生长（P＜0.05）;2)50μg/L的核因子κB受体活化因子配体浓度为最佳诱导浓度;3)不同浓度的紫草素呈浓度依赖性的抑制体外破骨细胞生成（P＜0.05）;4)不同浓度的紫草素呈浓度依赖性的抑制基质金属蛋白酶9、活化T细胞核因子1、核因子κB受体活化因子、组织蛋白酶K和原癌基因c-Fos等参与破骨细胞分化的标志性基因m RNA表达（P＜0.05）;结论:紫草素能够在体外呈浓度依赖性的通过抑制破骨相关基因m RNA的表达,进而抑制了核因子κB受体活化因子配体诱导的破骨细胞的生成。
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