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芦蒿是多年生草本植物,其丰富的营养价值和不错的保健功效,在上世纪90年代业已成为颇受欢迎的特种蔬菜,但是近年来有报道称芦蒿种植地出现大面积的植株腐烂,导致芦蒿减产和绝收。鉴于此,我们在南京市八卦洲芦蒿生产基地,开展了芦蒿腐烂的原因调查与相关研究:通过对病组织进行病原菌分离培养、回接再分离以及Biolog鉴定,验证出引起芦蒿腐烂的病原菌为胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum)。在秋季、春季,分别采集了发病区不同品种(青蒿和白蒿)外观健壮、没有病害症状的样本,室内提取DNA,以Pcc看家基因(Housekeeping genes)Fli4和RpoH分别设计的引物,进行PCR检测,发现秋季采集的青蒿和白蒿样本均检测出与阳性对照(PccS1)一致的条带,而春季采集的青蒿和白蒿均未检测出。表明在发病区,秋季健康植株带菌,病原菌呈潜伏浸染状态。在芦蒿发病区,春季采集了不同深度(深度分别为0-5、6-10、11-15 cm)的土壤样品,利用上述方法进行PCR检测,以Pcc看家基因设计的引物均能获得与阳性对照一致的条带,表明在春季病原菌存在于土壤中,并且在不同深度均有分布。虽然,Pcc接种各种植物组织后,在短短16小时内,植物组织表面即可以出现明显症状,但是本研究发现,尽管芦蒿茎段扦插在GFP荧光标记Pcc菌液28天,仍未见明显症状。通过组织学观察,在GFP标记Pcc菌液中,芦蒿茎段扦插7 d,组织中仍未见菌体;随后,插条上部出现新稍和幼叶,下部出现新根;直到21 d,插条在菌液界面上,3、6、9 cm处均能观察到荧光标记的Pcc菌体,且随高度上升,荧光强度下降。利用无菌基质吸附病原菌,发现在28℃下,离开寄主、缺乏营养Pcc存活长达28天。利用分离获得病原菌,对青蒿和白蒿植株相同叶序的叶片和对应茎段进行接种,结果发现:Pcc在白蒿的叶片和茎部浸染形成的病斑均比在青蒿上形成的病斑面积大,这与田间白蒿发病程度比青蒿严重相一致。