【摘 要】
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[目 的]本实验探讨人胰腺癌PANC-1细胞中切除修复交叉互补基因1（excision repair cross-completion group 1,ERCC1）表达差异对于PANC-1细胞使用铂类化疗药物敏感性的影响,为指导检测ERCC1基因表达及铂类化疗药物用于胰腺癌个体化治疗提供实验依据。[方 法]本实验首先选用常用人胰腺癌细胞株PANC-1,使用RT-PCR检测该细胞株ERCC1mRNA
【基金项目】
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昆明医科大学研究生创新基金（2020S161）；
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[目 的]本实验探讨人胰腺癌PANC-1细胞中切除修复交叉互补基因1（excision repair cross-completion group 1,ERCC1）表达差异对于PANC-1细胞使用铂类化疗药物敏感性的影响,为指导检测ERCC1基因表达及铂类化疗药物用于胰腺癌个体化治疗提供实验依据。[方 法]本实验首先选用常用人胰腺癌细胞株PANC-1,使用RT-PCR检测该细胞株ERCC1mRNA,通过实验筛选出高表达ERCC1基因的胰腺癌细胞株并作为目的细胞。通过慢病毒转染技术将目的细胞中ERCC1基因敲除,经过筛选获得稳定敲除ERCC1的胰腺癌细胞,利用RT-PCR检测实验处理前后目的细胞ERCC1mRNA表达量从而筛选出最佳慢病毒。本实验按对照组NC（正常目的细胞）和实验组KD（慢病毒转染目的细胞）进行分组,分别加入不同浓度梯度顺铂,使用CCK8药敏实验检测各组实验中细胞药敏结果,并以实验中各组细胞凋亡结果计算出细胞抑制率。[结 果]1.人胰腺癌细胞株PANC-1高表达ERCC1基因;2.PANC-1细胞转染慢病毒后,ERCC1表达水平显著降低,最佳慢病毒可使PANC-1中ERCC1基因敲除率达到91.6%（P<0.05）;3.CCK法检测不同溶度梯度处理PANC-1细胞后细胞抑制情况,结果如下:将两组细胞用一定溶度梯度的顺铂（0、1.25、2.5、5、10、20ug/mL）处理48小时后,检测细胞抑制率。实验组的最高细胞抑制率为（62.6%±0.56%）,高于对照组的最高细胞抑制率（60.5%±0.70%）（t=4.07,p=0.015）;使用顺铂处理对照组NC（正常目的细胞）和实验组KD（慢病毒转染目的细胞）,随着化疗药物浓度的递增,细胞抑制率呈现不断上升的趋势,且实验组的抑制率始终高于对照组抑制率（P<0.05）。[结论]本研究结果表明低表达ERCC1基因的PANC-1细胞对铂类化疗药物更敏感。
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