本研究通过构建热休克蛋白70(HSP70)的原核表达载体，试图体外获得纯化的HSP70蛋白。 方法:首先用SDS裂解的方法从胆管癌组织中提取基因组DNA作为模板。扩增目的基因。观察目的基因分离情况，并切胶回收目的基因片段。然后将目的基因与末端平滑处理后的质粒进行16℃连接反应，进行目的基因的克隆及序列测定。其次挑选白色菌落，提取质粒后，取1μl进行琼脂糖凝胶电泳，然后选取阳性质粒进行双酶切检测和PCR检测。构建重组表达载体。最后以IPTG诱导含有重组表达质粒pGEX-4T-1-HSP70的大肠肝菌JM109，进行目的蛋白表达、纯化及鉴定。 最后指出：本研究利用原核表达技术成功地在体外获得纯化的人HSP70蛋白。本研究结果对进一步研究HSP70蛋白和肿瘤抗原肽在肿瘤免疫中的作用和机制奠定了坚实的基础。