本文以四个碳苷黄酮总量在90%以上的高纯竹叶碳苷黄酮制剂(H-BLF)为芯材,以芫根阴离子多糖(TP)为壁材,以ε-聚赖氨酸(ε-PL)为阳离子桥,采用离子交联法制成纳米混悬液,进而在γ-环糊精(γ-CD)的保护下、通过真空冷冻干燥得到高纯竹叶碳苷黄酮的纳米粒子(H-BLFnp),采用多种技术手段对其结构和性能进行表征;并分别采用体内外评价体系,对H-BLFnp的保湿、美白和延缓衰老的护肤功效进行研究。主要研究内容及结果汇总如下:(1)以高纯竹叶碳苷黄酮制剂(H-BLF;用HPLC法测得荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷四个竹叶特征性碳苷的总量合计≥90%)为芯材,采用离子交联法键合形成竹叶碳苷黄酮的纳米混悬液(H-BLFnd);采用正交试验得出其优化的制备工艺参数为:TP浓度3mg/mL,TP与H-BLF的质量比12:1(w/w),ε-PL浓度0.4 mg/mL,恒流泵流速300 mL/h。然后,在混悬液中添加8%(w/v)的Y-环糊精(γ-CD)作为冻干保护剂,经真空冷冻干燥得到高纯竹叶黄酮的纳米粒子(H-BLFnp)。H-BLFnp外观呈白色,粉体光洁平整,测得其包埋率为(92.39±0.34)%;复溶于水后平均粒径为(679.7±10.2)nm,分散系数(PDI)为0.349±0.004;表明H-BLFnp粒径分布均匀,分散度良好。(2)采用紫外光谱(UV)、红外光谱(FTIR)对H-BLFnp的结构进行表征,H-BLFnp的UV光谱呈现出典型的黄酮带I和带II吸收峰,FTIR图谱显示H-BLFnd已进入γ-CD的空腔中,形成了环糊精的包合物。采用差示扫描量热法(DSC)及热重分析法(TG)研究H-BLFnp的热稳定性,结果表明,相较于纳米混悬液(H-BLFnd),纳米粒子(H-BLFnp)的熔融温度提高了 7.91 ℃、热焓值增加了 38.36 J/g,分解温度从246℃提高至324℃;H-BLFnp表现了更高的热稳定性。(3)以甘油为阳性对照,在恒湿条件下测定H-BLFnp的保湿率;结果表明在第36h时H-BLFnp的保湿率显著高于甘油(p<0.05)。采用小鼠B16黑色素瘤细胞模型,以β-熊果苷为阳性对照,研究H-BLFnp对B16细胞体外培养过程中相关指标的影响;结果表明,H-BLFnp对B16细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑色素生成均表现出浓度依赖的抑制作用,当H-BLFnp试样浓度为100 μg/mL时,抑制率分别为45.14%、72.55%和54.01%,均显著优于β-熊果苷(p<0.05)。小鼠皮肤刺激性和眼刺激性实验表明,H-BLFnp对皮肤及粘膜均无刺激作用,外用安全性高。(4)应用系列皮肤测试仪,对受试者使用含有5.0%H-BLFnp试样(人体涂抹量为2mg/cm2)前后的多项生理指标进行测定。结果表明,H-BLFnp能显著提高人体皮肤的水分含量、皮肤弹性、明亮度和光泽度,降低皮肤黑色素含量和经皮水分散失,表明H-BLFnp具有补水和减少水分散失、提高皮肤弹性、淡化色素和光泽皮肤的功效。综上所述,高纯竹叶碳苷黄酮纳米粒子(H-BLFnp)是一种组分天然、工艺绿色、亲水性好、性能稳定、安全无刺激的复合生物纳米材料,同时具有显著的保湿、美白和延缓衰老的生物学功效,可作为新型护肤功能因子,在日化产品(尤其是水润型产品)中具有良好的应用前景。