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目的:观察敌敌畏致大鼠ARDS时内源性H2S/CSE体系的变化及对核内转录因子和粘附分子的影响。方法:1.将健康的48只成年雄性SD大鼠,随机分成对照组和敌敌畏组,即生理盐水对照组和敌敌畏组,对照组大鼠予生理盐水2ml灌胃,敌敌畏组大鼠予以2ml敌敌畏溶液灌胃,用生理盐水将35mg/Kg的敌敌畏稀释成2ml。分别于下列时间点3h、6h、12h、24h随机处死两组实验大鼠中的6只。2.在各时间点进行以肺组织肉眼及镜下观察,进行肺损伤病理评分,监测动脉血氧分压及W/D在各时间点的变化,BCA法测定BALF中蛋白的含量,去蛋白法测血浆中硫化氢含量、亚甲基蓝法测肺组织CSE活性,肺组织切片行HE染色观察其病理变化、RT-PCR法测定肺组织中ICAM-1m RNA基因表达;western-blot法测定肺组织NF-κBp65的蛋白表达活性。结果:1.大体肉眼观:对照组大鼠肺形态结构大致正常。敌敌畏组3h组可见肺充血、水肿。随着时间延长肺损伤逐渐加重,可见肺组织表面呈暗红色、可见点片状出血。损伤在6h至顶峰,12-24h肺损伤有所回落。2.镜下观:对照组大鼠于各个实验观测时间点,其肺组织结构均正常。而敌敌畏组大鼠,在实验时间3h到6h,随着时间的延长,肺组织的受损越明显,可见肺泡间隔增宽,肺泡腔内明显可见炎性渗出,大批炎性细胞浸润现象。甚至可见部分肺泡腔内出现出血现象。随着时间增长,肺损伤越严重,肺损伤在6h达到高峰,12-24h肺损伤较前减轻,但至24h仍有肺泡间隔增宽,炎性细胞浸润,少量红细胞渗出,偶见透明膜的形成。3.肺损伤病理评分:敌敌畏组大鼠肺损伤病理评分与对照组相应时间点相比明显上升(P<0.01),有统计学意义,3h-6h随着时间延长,肺部损伤越严重,病理的评分值越高,且在6h的时候,病理评分最高。在12h到24h,有所下降,但并未恢复。4.大鼠Pa O2变化及其与肺损伤病理评分的相关性分析:对照组大鼠的动脉血氧分压在各实验观测时间点,无明显异常。敌敌畏组大鼠均出现Pa O2降低(P<0.01),并在6h Pa O2降至最低值。12-24h有所回升。大鼠Pa O2变化与肺损伤病理评分呈负相关。5.大鼠肺W/D的变化及其与肺损伤病理评分的相关性分析对照组大鼠肺W/D在各组中无明显变化。敌敌畏组各组肺组织W/D均升高(P<0.01),并在6h达到峰值,12-24h可见下降趋势。但未恢复正常。相关性分析显示:敌敌畏组大鼠W/D值与肺损伤病理评分值呈正相关。6.BALF中蛋白含量的变化及其与肺损伤病理评分的相关性分析:对照组各组大鼠肺泡灌洗液中蛋白浓度在均未见明显变化。敌敌畏组大鼠各组大鼠肺泡灌洗液中蛋白含量均升高(P<0.01)。并在6h达到峰值,12-24h可见下降趋势。但未恢复正常。相关性分析显示:大鼠BALF中蛋白含量值随着肺损伤病理评分值的升高呈升高趋势。7.大鼠血浆中H2S含量和肺组织CSE活性的变化及二者与肺损伤病理评分的相关性分析:对照组大鼠的血浆中H2S含量以及肺组织CSE活性在各实验观测时间点上,没有显著变化。敌敌畏组中大鼠在相同的实验观测时间点上,H2S的含量和CSE的活性都有出现降低。在6h的时候,H2S含量及CSE活性降至最低,12h到24h过程中,有所回升,但是依旧没有恢复正常。根据相关性分析:血浆里H2S含量和肺组织里面CSE活性与病理评分呈负相关。8.NF-κBp65蛋白表达的变化将敌敌畏组与对照组进行比较得出:肺组织中NF-κBp65表达均明显升高,且均有统计学意义(P<0.01);在6h的时候,NF-κBp65增至最高值。在12h到24h之间,NF-κBp65含量开始减少,但依旧没有恢复到正常水平。9.肺组织中ICAM-1m RNA的变化:将敌敌畏组与对照组进行比较,肺组织中ICAM-1 m RNA的含量出现持续升高,在6h的时候,该含量升至最高值,从12h开始该含量有所下降。到24h,ICAM-1m RNA依旧没有恢复正常水平。结论:1.在敌敌畏致大鼠ARDS中H2S/CSE体系下降,提示其可能参与ARDS的发病。2.在敌敌畏致大鼠ARDS肺组织中NF-κBp65及ICAM-1持续上升,提示两者可能均参与了ARDS的病理生理过程。