【摘 要】
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目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对过氧化氢诱导的氧化损伤大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC-Ⅱ)凋亡及水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响。方法取雄性健康SD大鼠,均予水合氯醛行腹腔注射
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目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对过氧化氢诱导的氧化损伤大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC-Ⅱ)凋亡及水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响。方法取雄性健康SD大鼠,均予水合氯醛行腹腔注射麻醉后予以气管插管,手术取出肺组织,分离提纯AEC-Ⅱ,将细胞以1×106个／ml浓度接种于培养板,原代培养24H。将分离提纯并原代培养后的AEC-Ⅱ的随机分为4组：正常组(加入生理盐水)；损伤组(加入H2O20.5mmol/L处理)；对照组(加入HO-10.2μmol/L处理)；保护组(同时加入HO-10.2μmol/L及H2O20.5mmol/L处理),将处理后的各组细胞继续培养12H,于第OH,1H,3H,6H及12H分别取各组细胞以流式细胞仪检测细胞凋亡率并予以Western blotting法测定AQP-1含量。结果损伤组AQP-1表达水平在1H,3H,6H及12H较其他组均显著下降(p<0.05),对照组及保护组AQP-1表达均高于正常组及损伤组(p<0.05),在约6小时水平达到高峰。其中对照组表达水平最高(p<0.05)。损伤组的细胞凋亡率相对其他组显著增加(p<0.05)。保护组细胞凋亡率低于损伤组,但高于对照组及正常组(p<0.05)。对照组及正常组凋亡率无显著统计学差异(p>0.05)结论H2O2诱导引起氧化损伤的体外培养AEC-Ⅱ细胞中,不同时间细胞凋亡率随AQP-1下降而增加。HO-1可上调H2O2诱导的氧化损伤AEC-Ⅱ的AQP-1表达并降低细胞凋亡率。AQP-1表达上调可能是HO-1抗氧化损伤机制之一。
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