【摘 要】
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组织培养技术被广泛用于满天星良种繁育,但传统的组培方法有待进一步改进。在固体培养基成分确定的基础上,应用生物反应器进行繁殖对大量提供组培苗具有重要意义。本试验以满天
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组织培养技术被广泛用于满天星良种繁育,但传统的组培方法有待进一步改进。在固体培养基成分确定的基础上,应用生物反应器进行繁殖对大量提供组培苗具有重要意义。本试验以满天星茎段为试材,对满天星常规固体增殖培养基的组成进行了研究,且为了改进常规组织培养法在生产满天星组培苗时的不足,初步探索了利用生物反应器进行满天星增殖培养的可行性,并对培养过程中生物反应器的几个可控环境进行了调试。固体培养基成分对满天星增殖影响的研究结果表明:MS基本培养基比SH、B5和White基本培养基更有利于满天星的增殖;含NH4+/NO3-20/40 mM,总氮量90 mM的MS培养基加倍后能使满天星组培苗增殖率更高更健壮;与果糖和葡萄糖相比,蔗糖更有利于满天星增殖;30 g/L的蔗糖对满天星增殖生长有促进作用,同时抑制玻璃苗的发生。比较了生物反应器液体培养和传统固体培养对满天星增殖的影响,发现在生物反应器内液体培养的每个外植体增殖个数达15.7个,而固体培养时仅为11.6个,且不定苗的鲜物重和干物重显著优于固体培养,大大缩短了生长周期。因此利用生物反应器繁殖满天星不定苗是一种有效可行的方法。采用2.5L柱状气升式生物反应器对其内部可控环境进行了调试,认为接种密度35个比接种密度25个和45个更有利于满天星的增殖,既充分利用了空间又获得了大量健壮的不定苗;满天星增殖采用生物反应器培养时4800 Lux光照强度对满天星增殖培养最为有效;反应器底部采用孔隙15μm的多孔喷头,注入0.10vvm空气,上部接种4天后用圆形喷头通入0.10 vvm空气更有利于满天星增殖培养。
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