地中海拟无枝菌酸菌U32甲基丙二酰CoA变位酶和Ser/Thr蛋白激酶的基因克隆及功能分析

来源 :中国科学院上海植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:web53dns
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我们用来自黄褐色链霉菌的编码mcm基因作为异源探针,从地中海拟无枝菌酸菌U32中克降了甲基丙二酰CoA变位酶结构基因mcmAB.分别对可能含有mcMAB的DNA片段进行序列测定,结果发现了三个ORF:其中两个首尾重叠的分别编码MCM的小亚基(602个氨基酸残基)和MCM大亚基(721个氨基酸残基),以及转录方向与之相反的编码一种真核样Ser/Thr蛋白激酶的结构基因pkmA.将mcmAB结构基因链在T7启动子之后,在大肠杆菌中高效表达了MCM,重组MCM在添加辅酶B<,12>时测定具有较高的活力.对地中海拟无枝菌酸菌U32染色体上的mcmAB基因进行了基因中断,mcm突变体仍能受硝酸盐的正调节,但产生力复霉素的时间略有推迟.
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