胶原蛋白酶产生菌的筛选和应用研究

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从堆积废弃毛皮和皮革的场所采集土样中,获得95株具有明胶酶活性菌株,其中有2株菌(CY-1和CY-2)能在48小时内完全消化小牛皮.以Ⅲ型酸溶性胶原为底物,测定了2株菌发酵培养液中胶原蛋白酶的活性,结果表明这2株菌都具有胶原蛋白酶的活性,而且其产酶活力基本相同,约10-16U/mL.经形态观察、生理生化特征分析及BIOLOG微生物鉴定仪鉴定,CY-1为铜绿假单胞菌(Pseudumonas Aeraginosa),CY-2为火神发光杆菌(Photobacterium Logei).对铜绿假单胞菌产生的胶原蛋白酶粗酶与木瓜蛋白酶、胰蛋白酶水解鲜猪皮的特性进行了对比试验,发现铜绿假单胞菌胶原蛋白酶对鲜猪皮的降解能力远远强于其他两种植物蛋白酶.采用正交分析的方法,研究了铜绿假单胞菌胶原蛋白酶和木瓜蛋白酶协同降解鲜猪皮制备胶原蛋白和肽的工艺条件,其最佳条件为温度45℃,液比2,时间24h,pH7,混合酶0.6%.最后评价了所得胶原蛋白的理化性质、卫生指标、氨基酸组成和分子量分布等.
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