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烟碱是有害物质,对人体危害极大,如何降低烟草的烟碱含量一直是国内外研究热点,物理化学的方法可以将烟碱的含量降得很低,但同时也降低香气的含量和品质。论文研究从降碱增香微生物的分离鉴定,筛选,优良菌株的培养条件研究,菌剂的作用机理及使用方法研究,田间应用,菌剂处理复烤自然醇化后烟叶的感官评价,菌剂处理进入“玉溪”牌卷烟后对烟质的影响,降碱增香菌处理烟叶致香成分分析这几个方面对降碱增香微生物从机制到应用进行研究。主要研究成果:]、降碱增香微生物的分离鉴定:本项目通过富集培养,使用以烟碱为唯一碳源的选择性培养基,从烟草、烟厂污水样品和土壤样品中获得2680多株降碱菌株。经16S rRNA序列测定和主要生理生化性能的测定,从烟叶上分离的降烟碱细菌主要是假单孢菌,土壤中的降碱菌以节杆菌为优势种群。2、降碱增香微生物的筛选:在白肋烟晾制初期和烤烟烘烤前将节杆菌喷施于烟叶表面,调制结束后测定烟叶化学成分与内在品质的变化。各菌株对白肋烟不同部位烟碱含量的影响最为显著,可使烟碱降解率达40%以上,最高可达54.22%,最低亦达7.12%。3、降碱增香微生物优良菌株的培养条件研究:对筛选获得的4号、9号菌株的培养条件进行了优化,适宜4号和9号的培养条件分别为30℃、pH 6.5、48h和35℃、pH 6.5、56h。发酵培养基的优化和发酵条件的筛选为这两个菌株的应用奠定了基础。4、降碱增香微生物菌剂的作用机理及使用方法研究:各菌株对白肋烟不同部位烟碱含量的影响最为显著,可使烟碱降解率达40%以上,最高可达54.22%,最低亦达7.12%。通过不同的施用方法的实验,我们认为烟叶烤前施用降碱增香菌活菌制剂是一种可靠简单的使用方法。5、降碱增香菌株的田间应用:细菌处理后,烟叶的香气质、香气量有不同程度的增加,对中部叶香气质的影响最大,但两个菌株之间差异不明显。在香吃味方面,使用菌株后,烟气细腻、刺激性减轻,劲头有所下降且余味改善。6、菌剂处理复烤自然醇化后烟叶的感官评价:经过4号和9号烤前处理的烟叶经过复烤和1年的自然醇化后,进行感官质量的评价,各部位烟叶品质明显优于对照烟叶。7、菌剂处理进入“玉溪”牌卷烟后对烟质的影响:通过专家评吸鉴定,菌剂处理的卷烟,处理样品香气浓馥清雅,丰富而饱满,香气质细腻,谐调性好,无杂气,无刺激,余味纯净、舒适,评吸总分高于对照。8、降碱增香菌处理烟叶致香成分分析:致香成分分析结果表明,经过菌剂处理的烟叶致香成分含量发生了变化,提高烟叶香气量和香气质,降低了烟碱含量,改善了烟叶品质,提高烟叶可用性。