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目的： 1、比较支气管哮喘急性发作期儿童、支气管哮喘临床缓解期儿童及健康儿童外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中组胺H2受体(histamine H2receptor,H2R)、组胺H4受体(histamine H4receptor,H4R)的表达差异,探讨H2R、H4R与支气管哮喘的关系. 2、比较支气管哮喘患儿给予玉屏风颗粒治疗前后PBMCs中H2R、H4R的表达差异,探讨玉屏风颗粒对于支气管哮喘患儿H2R、H4R表达的影响. 3、比较支气管哮喘急性发作期儿童、支气管哮喘临床缓解期儿童及健康儿童血清IL-12(P70)水平差异,探讨IL-12(P70)与支气管哮喘的关系. 4、比较予玉屏风颗粒治疗前后支气管哮喘患儿血清IL-12(P70)水平的变化,探讨玉屏风颗粒对于支气管哮喘患儿血清IL-12(P70)水平的影响. 方法： 1、支气管哮喘儿童PBMCs中H2R和H4R的表达 选择支气管哮喘急性发作期儿童、临床缓解期儿童及健康儿童各60例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescent quantification polymerase chain reaction,qPCR)和蛋白印迹法(western blot)两种方法分别检测这三组儿童PBMCs中H2R和H4R的mRNA及蛋白表达. 2、支气管哮喘患儿予玉屏风颗粒治疗前后H2R和H4R的表达 选取60例支气管哮喘患儿,分为治疗组和对照组,用qPCR及western blot法测定两组患儿给予治疗前后PBMCs中H2R和H4R的mRNA及蛋白表达. 3、IL-12(p70)在支气管哮喘患儿血清中的水平及予玉屏风颗粒治疗前后血清IL-12(p70)水平的改变 用酶联免疫吸附试验(emzyme linked immunosorbent asssy,ELISA)检测支气管哮喘急性发作期儿童、支气管哮喘临床缓解期儿童及健康儿童血清IL-12(p70)的含量及比较支气管哮喘患儿治疗组和对照组治疗前后血清IL-12(p70)水平的变化. 结果： 1、H2R、H4R在支气管哮喘患儿中的表达 哮喘急性发作期组H2R的mRNA水平为(1.67±0.39),哮喘临床缓解期组H2R的mRNA水平为(1.06±0.32),健康对照组H2R的mRNA水平为(1.00±0.30).哮喘急性发作期组儿童PBMCs中H2R的mRNA的表达均高于哮喘临床缓解期组儿童和健康儿童(p<0.05),但哮喘临床缓解期组儿童H2R的mRNA的表达与健康儿童相比无统计学差异(p>0.05). 哮喘急性发作期组H4R的mRNA水平为(2.12±0.38),哮喘临床缓解期组H4R的mRNA水平为(1.11±0.34),健康对照组H4R的mRNA水平为(1.00±0.30).哮喘急性发作期组儿童PBMCs中H4R的mRNA的表达均高于哮喘临床缓解期组儿童和健康儿童(p<0.05),但哮喘临床缓解期组儿童H4R的mRNA的表达与健康儿童相比无统计学差异(p>0.05). 哮喘急性发作期组儿童H2R和H4R的蛋白表达均显著高于健康儿童组和哮喘临床缓解期组儿童,H2R和H4R的蛋白表达在哮喘临床缓解期组儿童与健康儿童无明显差异. 2、玉屏风颗粒对于支气管哮喘患儿H2R和H4R表达的影响 治疗组治疗前H2R的mRNA水平为(1.55±0.36),治疗组治疗后H2R的mRNA水平为(1.06±0.19),对照组治疗前H2R的mRNA水平为(1.48±0.35),对照组治疗后H2R mRNA水平为(1.34±0.27).治疗组治疗前H2R的mRNA水平与对照组治疗前H2R的mRNA水平无显著性差异(p>0.05),有参照意义;治疗组H2R的mRNA水平在治疗前后有统计学差异(p<0.05);对照组H2R的mRNA水平在治疗前后无统计学差异(p>0.05);治疗组治疗后H2R的mRNA水平与对照组治疗后H2R的mRNA水平有统计学差异(p<0.05). 治疗组治疗前H4R的mRNA水平为(1.97±0.30),治疗组治疗后H4R的mRNA水平为(1.19±0.20),对照组治疗前H4R的mRNA水平为(1.94±0.31),对照组治疗后H4R mRNA水平为(1.78±0.31).治疗组治疗前H4R的mRNA水平与对照组治疗前H4R的mRNA水平无显著性差异(p>0.05),有参照意义;治疗组H4R的mRNA水平在治疗前后有统计学差异(p<0.05);对照组H4R的mRNA水平在治疗前后无统计学差异(p>0.05);治疗组治疗后H4R的mRNA水平与对照组治疗后H4R的mRNA水平有统计学差异(p<0.05). 治疗组哮喘患儿H2R、H4R的蛋白表达在治疗前后有差异,对照组H2R、H4R的蛋白表达在治疗前后无明显差异. 3、IL-12(p70)在支气管哮喘患儿中的表达水平及玉屏风颗粒对于哮喘患儿血清IL-12(p70)水平的影响 哮喘急性发作期组IL-12(p70)水平为(271.91±30.70),哮喘临床缓解期组IL-12(p70)水平为(335.54±34.62),健康对照组IL-12(p70)水平为(345.12±39.09).哮喘急性发作期组儿童IL-12(p70)水平明显低于临床缓解期组儿童和健康儿童,其差异有统计学意义(p<0.05);临床缓解期组儿童IL-12(p70)水平与健康儿童差异无统计学意义(p>0.05). 治疗组治疗前IL-12(p70)水平为(285.70±29.92),治疗组治疗后IL-12(p70)水平为(328.79±30.33),对照组治疗前IL-12(p70)水平为(288.50±30.92),对照组治疗后IL-12(p70)水平为(304.05±30.07). 治疗组治疗前IL-12(p70)水平与对照组治疗前IL-12(p70)水平无统计学差异(p>0.05),有参照意义;IL-12(p70)水平在治疗组治疗前后有统计学差异(p<0.05);IL-12(p70)水平在对照组治疗前后无统计学差异(p>0.05);治疗组治疗后IL-12(p70)水平与对照组治疗后IL-12(p70)水平相比有统计学差异(p<0.05). 结论： 1、支气管哮喘急性发作期儿童PBMCs中H2R、H4R的mRNA和蛋白表达均显著高于健康儿童和支气管哮喘临床缓解期儿童.临床缓解期的支气管哮喘患儿PBMCs中H2R、H4R的表达能降至健康儿童水平.H2R、H4R可能参与支气管哮喘的发病过程. 2、支气管哮喘患儿予玉屏风颗粒治疗前后H2R、H4R的mRNA和蛋白的变化较对照组治疗前后的变化有明显差异,说明玉屏风颗粒可减少H2R、H4R的表达. 3、支气管哮喘急性发作期患儿血清IL-12(p70)水平明显低于支气管哮喘临床缓解期患儿及健康儿童.处于临床缓解期的支气管哮喘患儿IL-12(p70)水平能提升至健康儿童水平,IL-12(p70)可能参与支气管哮喘的发病过程. 4、支气管哮喘患儿予玉屏风颗粒治疗前后血清IL-12(p70)水平的变化较对照组治疗前后血清IL-12(p70)水平的变化有明显差异,说明玉屏风颗粒可提升IL-12(p70)水平. 5、玉屏风颗粒可能通过调节H2R、H4R的表达而调节IL-12(p70)的水平,从而对哮喘起免疫调节作用.