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目的:通过应用升主动脉套扎法制作慢性心力衰竭兔模型,分别给予不同处理方法,观察心脏超声指标、血浆BNP水平同时应用Western blot和免疫组化法测定β1-AR密度,探讨心脏收缩力调节联合比索洛尔对慢性心力衰竭兔心功能影响,进一步探讨心脏收缩力调节发挥正性肌力作用与交感神经的关系。方法:选用40只新西兰大白兔,体重在2.5-3.5kg之间,雌雄不限,均有河北医科大学动物实验中心提供。1 CHF动物模型制作:采用升主动脉缩窄致压力负荷过重形成CHF模型。3%戊巴比妥钠(1ml/kg)耳缘静脉麻醉后取胸骨左旁剪断三、四肋骨,暴露心脏,于升主动脉中段分离并结扎升主动脉,环扎穿有4号丝线的约15-20 mm聚氯乙烯管(内径1mm),造成升主动脉狭窄60%。术后给予青霉素(160万U/d,肌肉注射,共3d),标准饲料喂养,自由饮水,术后12周筛选符合心衰标准的动物模型。心力衰竭模型建立成功的标准:心输出量下降30%或(和)左室舒张末压上升至2.4Kpa(18mmHg)以上。2分组:随机分为4组:心衰对照组(HF group)、心脏收缩力调节组(CCM group)、比索洛尔组(Drug group)、联合处理组(Combined group),每组10只。实验前分别记录各组实验动物体重、呼吸、心率。3心脏收缩力调节:分别给予CCM组和联合组实验动物小儿用临时起搏电极弯针端缝合于左心室前壁,保持裸露导线与心肌组织接触,且与胸壁组织绝缘,直针端通过皮下穿刺固定于颈部。于窦性心律下,通过电极头端感知心电R波后触发刺激仪发放绝对不应期电刺激(2ms,7V,R波感知后延迟30ms发放),每天刺激6小时,连续刺激4周。4观察指标:观察处理前后各组体重、心率、呼吸频率。在相应处理前后采用心脏超声仪测定左室收缩末内径(Left ventricular end systolic dimension,LVESD)、左室舒张末内径(Left ventricular end diastolic dimension,LVEDD)、左室短轴缩短率(Left ventricular fractional shortening,lvfs)、室间隔厚度(interventricularseptalthickness,ivs)、左室后壁厚度(leftventricularposteriorwallthickness,lvpw)、左室射血分数(leftventricularejectionfraction,lvef)、e/a比值。5血浆bnp水平测定所有实验动物分别于造模成功后及给予相应处理后4周经颈静脉采血5ml,采用abc-elisa法测定血浆bnp浓度。6心肌组织β1受体蛋白表达测定完成ccm刺激及上述指标参数测定后,心腔内注射空气处死动物,留取心肌组织标本,分别采用蛋白印迹法(westernblot)、免疫组化法测定各组β1-ar蛋白表达。结果:1实验动物存活情况:心衰组和联合组中分别有1只实验动物因术中出现气胸死亡,药物组和心脏收缩力调节组分别有1只实验动物因术中出血死亡,药物组和联合组因操作不当分别死亡1只,联合组1只实验动物因术后感染死亡1只。术后存活且满足心衰标准的动物模型共有33只:心衰组9只,心脏收缩力调节组9只,药物组8只,联合组7只;2各组实验动物给予相应处理前收集各组实验动物一般情况、各项心脏超声指标及血清bnp水平无统计学意义(p>0.05);3对血浆bnp的影响造模术后12周分别测各组血浆bnp水平无明显差别(p>0.05)。分别给予相应处理后4周血浆bnp水平以联合组降低最为显著,其次为心脏收缩力调节组、药物组(p<0.05),后两组血浆bnp水平无明显统计学意义(p>0.05),心衰对照组血浆bnp水平较之前无明显变化(p>0.05);4对心功能的影响造模术后12周4组心脏超声结果无统计学意义(p>0.05)。术后12周,除对照组其余3组给予对应处理连续4周。与对照组相比,其余三组lvesd、lvedd明显下降,以联合组下降最为显著(p<0.05),lvef、lvfs、e/a明显上升,以联合组升高最明显(p<0.05),心脏收缩力调节组与比索洛尔组间各指标无明显差异,无统计学意义(p>0.05)。ivs、lvpw刺激前后与各组间各项指标无明显变化(p>0.05);5β1-ar蛋白表达5.1蛋白印迹法(westernblot):与心衰对照组相比,其余三组β1-ar蛋白表达升高,其中以联合组升高最为显著(p<0.05);药物组与ccm组无明显统计学差异(p>0.05);5.2免疫组化法:与心衰对照组相比,药物组、心脏收缩力调节组、联合组β1-AR蛋白表达升高,其中以联合组升高最为显著(P<0.05);药物组与心脏收缩力调节组无明显统计学差异(P>0.05)。结论:1心脏收缩力调节可改善心功能。2心脏收缩力调节联合β1受体阻滞剂可上调心肌组织β1受体的表达水平。