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本试验通过考察乳源活性物质EGF、Gln和pGRF基因质粒单独使用及在不同组合形式下对早期断奶仔猪生长的影响、作用特点、途径及机制,为上述物质在早期断奶仔猪上的开发利用提供理论依据,特进行了如下四个试验。试验一选用28±2d日龄断奶,平均体重为7.83±0.45kg的同窝三元杂交猪(大×长×太)8头,随机分为2个处理,通过腹部皮下注射方式分别注射EGF和生理盐水,注射剂量4μg/kgBWday-1。试验二选用21±2d断奶,平均体重为5.96±0.62kg的三元杂交猪(杜×长×大)25头,按照EGF注射剂量随机分为1、3、6、9μg/kgBWday-1和对照组共5个处理,给药方式同试验一。试验三分为两个小试验,均选用21±2d断奶,平均体重分别为3.76±0.41kg和4.00±0.64kg的三元杂交猪(大×长×太)各9头,随机分为3个处理,给药方式同试验一。注射剂量及次数:第一个小试验分为1.0、0.5和0μg/kgBWday-1三个水平,均连续注射;第二个小试验分为1.0μg/kgBWday-1连续三次注射、1.0μ g/kgBWday-1水平仅注射一次和0.5μg/kgBWday-1仅注射一次三个处理。试验一、试验二与试验三主要考察EGF用于早期断奶仔猪的剂量范围、有效剂量及注射次数,主要测定生产性能(ADG、ADFI和F/G、腹泻指数),并对EGF的量效关系进行分析。在前三个试验基础上,第四个试验选用28±2d日龄断奶,平均体重为4.51±0.54kg的三元杂交猪(长×大×太)42头,按照EGF、Gln和pGRF基因质粒的不同组合形式,随机分为7个处理,考察其对早期断奶仔猪生产性能、腹泻情况、皮毛发育、肠道损伤修复、免疫功能、相关激素水平的影响及pGRF基因质粒在仔猪体内的表达情况。42日龄时,在EGF、EGF+Gln、EGF+pGRF基因质粒和EGF+Gln+pGRF基因质粒处理的三个重复中,每个重复随机选择一头屠宰。试验测定了早期断奶仔猪的生产性能、腹泻率与腹泻指数、毛色分数、日粮粗蛋白消化率、主要消化器官重量、空肠绒毛高度、粘膜刷状缘碱性磷酸酶活性、细菌移位率、血清IgG水平,并用放射免疫分析法测定了皮质醇和生长激素浓度。本试验重点考察EGF单独使用及其与Gln、pGRF基因质粒的不同组合减轻应激对早期断奶仔猪生长及肠道发育不利影响的可行性。 试验结果表明: 1.EGF单独使用,在1.0μg/kgBWday-1到6.0μg/kgBWday-1范围之内呈明显的剂量一效应关系,最佳水平为6.0林g/kgBwday一‘;同时,在低剂量(l .0“g/kgBwday一‘)条件下,EGF的效果与注射次数密切相关。 2.在改善生产性能方面,在本试验日粮(中低营养水平、低比例乳清粉和鱼粉、未用血浆蛋白粉)条件下,EGF、Gln和pGRF基因质粒单独使用及其组合形式与对照组相比,均表现出良好的效果并存在一定的后续效应,但这种作用主要体现在断奶后第二周。其中,单独使用时,EGF与pGRF基因质粒基本相当,均优于Gln;两两组合作用明显改善,均不同程度超过各自单独应用,表现出良好的协同效应,但EGF+Gln与EGF+pGRF基因质粒之间并未表现出明显差别(P>O.05);EGF+Gln+pGRF基因质粒的三者联合使用形式作用最为突出,与对照组相比,提高仔猪试验末重48.02%(P<0 .01),全期日增重1.68倍(P<0.01),降低料肉比50.75%(P<0.01),同时改善日粮粗蛋白表观消化率1.13倍(P<0.01),提高毛色分数14.03(P<0 .05),而且全期均未发生腹泻,其作用远优于EGF+Gln和EGF+pGRF基因质粒的两两组合形式及其各自单独使用。此外,从EGF与pGRF基因质粒单独使用、EGF+pGRF基因质粒两两合用到进一步加入Gln,采用EGF+Gln十pGRF基因质粒三者联合使用形式,生产性能的改善呈逐渐递升的特点,效果随组合因子的增加而日趋显著。 3.在减轻应激造成的肠道损伤方面,EGF十Gln和EGF+pGRF基因质粒的两两组合形式在促进肠绒毛的发育这一反映肠道修复情况的关键指标方面,效果较为理想,均不同程度的优于EGF组。其中,EGF+pGRF基因质粒作用更为明显,该处理肠绒毛长度超过对照组44.35%,EGF组和EGF+Gln组分别为18.24%和17.77%。在EGF与Gln、pGRF基因质粒的各种组合形式中,与生产性能的变化类似,随着与EGF组合因子的增加(EGF一EGF十pGRF基因质粒一EGF+Gln+pGRF基因质粒),其对仔猪肠道发育的效果也日趋明显,特别是以EGF+Gln+pGRF基因质粒的三者联合使用形式的作用最为突出,增加小肠重量17.12%(P(0.1)、空肠重96.02%(P<0.05),提高肠绒毛长度89.68%(P(0.1),细菌移位率为零。 4.在对仔猪的免疫功能调节方面,与对照组相比,EGF及其与Gln、pGRF基因质粒的组合形式对全期仔猪血清工gG浓度均表现出不同程度的下降。逐周来看,各处理则表现为第1周不同程度超过对照组,2一3周除EGF+Gln组外均不同程度下降的特点。其中,以EGF+pGRF基因质粒和EGF+G1。+pGRF基因质粒两种组合形式的变化较为突出,其血清IgG水平,断奶后第z周分别比对照组增加2 1.71%(P<0.05)和11.24%(P<0.1);但第2、3周,与对照组相比,EGF十pGRF基因质粒组分别降低9.53%(P<0 .01)和1.35%;而同期EGF+Gln+PGRF基因质粒组分别降低5.06%(P<0.1)和3.02%。 5.在对仔猪体内与生长相关激素水平的影响方面,pGR