论文部分内容阅读
本研究是为了筛选出产纤维素酶活性较高、而对氧气需求不高的兼性厌氧芽孢杆菌。试验以新鲜奶牛粪便为样品,利用芽孢杆菌耐高温的特性,经80℃水浴杀死非芽孢菌,从而分离筛选出一批芽孢杆菌。采用刚果红平板染色法,并通过对透明圈的测定和计算,选出13株具有较高纤维素酶活性的菌株。在对这批菌株进行生理生化鉴定的基础上,选出一株产纤维素酶活性较高、兼性厌氧梭状芽孢杆菌。将其制成菌悬液,按0.5ml/只的剂量,腹腔注射平均体重20g的小鼠,测定出对小鼠的半数致死量为2.3×1010/ml,按每克日粮中活菌(或孢子)数为2×105~106个的标准,证实该菌株添加到动物日粮中具有较高的安全性。对筛选出的菌株进行产纤维素酶条件的研究,测定影响细菌产酶的几种主要因素(碳源、氮源、发酵温度、发酵时间、培养基初始PH、接种量)在不同条件下对酶活力的影响,从而筛选出最适产酶条件。首先分别测定单因素条件下每种因素对纤维素酶活的影响,根据单因素条件下的测定结果,设计6因素三水平正交试验(L27(313))对其产酶条件进行了优化,从而筛选出最佳发酵产酶培养条件为:碳源:麸皮1%,氮源:牛肉膏2%,初始pH:8,发酵温度:42℃,发酵时间:36h,接种量3%。将筛选出的菌株制成活菌制剂,选用24只生理指标基本一致的断奶家兔进行饲喂试验,试验分对照组(基础日粮)和实验组(添加活菌制剂),饲喂30天后,计算增重情况和饲料报酬,测定粪便和不同肠段中纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶活性,比较两组间差异性。结果表明,试验组与对照组相比,两组间增重效果和料重比均有明显差异,经统计分析差异极显著(P<0.05)。其中,试验组日增重比对照组提高7.91g/只,而料重比下降了15.2%,说明在家兔日粮中添加由分离菌株制成的活菌制剂后,有明显的促生长作用,而且试验组日粮得到了更有效的消化吸收。酶活力的测定结果表明:粪便及肠道中纤维素酶活力有明显提高,试验组与对照组差异极显著(P<0.01)。蛋白酶活力则无明显变化,试验组与对照组差异不显著(P>0.05)。淀粉酶活力也受到一定影响,肠壁中淀粉酶活力,试验组略高于对照组,方差分析不显著(P>0.05);盲肠内容物中,试验组与对照组淀粉酶活力差异极显著(P<0.01);而空肠内容物中,试验组比对照组淀粉酶活力有明显提高,差异显著(P<0.05),表明在日粮中添加了该活菌制剂,对淀粉酶活力有一定的影响。