本文以初生Wistar大鼠的颅骨成骨细胞为研究对象，采用生物力学、细胞生物学、分子生物学等方法，研究流体剪应力对成骨细胞生理活性和一氧化氮合酶(NOS)基因表达的影响，初步探讨NOS在流体剪应力调节成骨细胞生理活性过程中的作用机制。主要工作和结论如下： ① 采用组织块法培养初生Wistar大鼠的颅骨成骨细胞，并利用差时贴壁法对其进行纯化。通过形态观察、Von Kossa染色对细胞进行鉴定。结果表明培养的细胞具有成骨细胞的典型生物学行为。 ② 设计加工对单层成骨细胞施以流体剪应力的流动腔装置。该装置能够提供充分发散的层流态流体，通过流量控制调节剪应力的大小。整套装置组装简便，受试细胞量大(1×10~5个)，所需灌流液可控制在50ml以内，能够对细胞进行有效的剪应力刺激，研究表明能满足对各项生化指标的检测。 ③ 对成骨细胞施加10、30 dynes／cm~2两个水平的流体剪应力，每个水平的力分别作用1，2，4，6，8，12，24，36h。应用流式细胞仪技术研究流体剪应力对成骨细胞增殖的影响，探讨此类细胞在力学生理条件下的生长行为。结果显示，10dynes／cm~2的剪应力能够促进细胞增殖。作用12h细胞的增殖指数提高了43.8％。30 dynes／cm~2的剪应力抑制了细胞的增殖，并随加载时间的延长，抑制作用越强。 ④ 对成骨细胞施加10、30 dynes／cm~2两个水平的流体剪应力，每个水平的力分别作用1，2，4，6，8，12，24，36h。检测成骨细胞ALP活性和胞外钙分泌的变化。结果显示，10 dynes／cm~2剪应力作用下ALP的活性提高。30 dynes／cm~2剪应力降低了ALP的活性。剪应力作用下钙分泌10 dynes／cm~2剪应力＞30 dynes／cm~2剪应力。由此认为，10 dynes／cm~2剪应力作用能够促进成骨细胞的分化成熟，以及矿化基质的形成。 ⑤ 对成骨细胞施加10、30 dynes／cm~2两个水平的流体剪应力，每个水平的力分别作用1，2，4，6，8，12，24，36h。检测成骨细胞NO分泌的变化。结果显示，剪应力作用下不同时间的剪应力作用，成骨细胞在NO含量上表现出差异性响应。10 dynes／cm~2剪应力作用更能促进低浓度NO的生成。30 dynes／cm~2剪应力作用下，成骨细胞短时间内便产生高浓度的NO。 ⑥ 对成骨细胞施以10、30 dynes／cm~2两个水平的流体剪应力作用1，2，4，6，8，12，24，36h，采用RT-PCR检测成骨细胞eNOS mRNA、iNOS mRNA的表达状况。结果显示，与静态相比两种水平的剪应力都能影响iNOS mRNA和eNOSmRNA的表达。其中iNOS较eNOS对剪应力的作用更加敏感。10 dynes／cm~2剪应