喉鳞状细胞癌中miR-93及其靶基因CDKN1A/p21的表达及相关研究

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目的:选择喉鳞状细胞癌与癌旁正常组织中差异表达的miR-93及其靶基因CDKN1A/p21,探讨二者在喉鳞癌中的表达及关系。通过免疫组织化学方法并结合相关临床病理资料分析CDKN1A/p21及PDCD4表达与相关病理参数间的关系,及二者间的相关性,揭示CDKN1A/p21及PDCD4影响细胞周期的可能作用,为喉鳞癌的早期诊断及治疗提供新的理论依据及靶点选择。方法:调取2012年1月-2013年10月山西医科大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科及山西省肿瘤医院头颈外科67例喉癌患者喉鳞状细胞癌及癌旁正常组织石蜡包埋组织标本,并详细记录相关临床病历资料。预实验阶段通过基因芯片分析,筛选出喉鳞癌组织及癌旁正常组织中差异表达的microRNA,进一步通过qRT-PCR重复检测喉鳞癌组织及癌旁正常组织间miR-93的表达,并验证其表达差异。TargetScan预测miR-93下游靶基因,选取CDKN1A/p21进一步研究,qRT-PCR检测喉鳞癌组织中miR-93及CDKN1A/p21mRNA的表达及关系,并结合患者性别、年龄、肿瘤部位、T分期、分化程度及淋巴转移等情况进行统计学分析。使用免疫组织化学法检测CDKN1A/p21及PDCD4蛋白在喉鳞癌及癌旁正常组织中的表达,并结合患者性别、年龄、肿瘤部位、T分期、分化程度及淋巴转移等情况进行统计学分析。结果:(1)与癌旁正常组织相比,miR-93在喉鳞状细胞癌组织中的表达升高(P=0.000),CDKN1A/p21mRNA在喉鳞癌组织中表达下降,且二者表达水平呈负相关(r=-0.563,P=0.000)。(2)miR-93在喉鳞癌组织中高表达,且与高T分期、中低分化及有淋巴结转移相关,且差别有统计学意义(P<0.05)。CDKN1A/p21mRNA在喉鳞癌组织中的低表达与喉鳞癌低分化及淋巴结转移有关,差别有统计学意义(P<0.05)。(3)CDKN1A/p21及PDCD4在喉鳞癌组织中阳性表达率均明显低于癌旁正常组织(P=0.038,P=0.038)。PDCD4与CDKN1A/p21的阳性表达呈正相关(r=0.478,p=0.000)。(4)喉鳞癌石蜡包埋组织中, CDKN1A/p21低表达与中低分化及淋巴结转移相关,差异有统计学意义(P<0.05)。PDCD4低表达与高T分期及中低分化有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:与癌旁正常组织相比,喉鳞癌中miR-93表达上调,CDKN1A/p21与PDCD4表达下降,联合检测miR-93靶基因CDKN1A/p21及PDCD4可作为喉鳞癌诊断治疗的新指标。
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