ERS标志物PDI表达对肝癌细胞迁移的影响

来源 :贵州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lantianaaaaa
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目的:探讨内质网应激(ERS)前后肝癌细胞中蛋白质二硫键异构酶(PDI)的表达水平及PDI过表达对肝癌细胞迁移能力的影响。  方法:取培养的第3代人正常肝细胞株LO-2、肝癌细胞株HepG2和高转移能力肝癌细胞株SMMC-7721,采用150 mmol/L无水乙醇处理48 h诱导发生ERS;采用Western blot方法检测无水乙醇处理前后葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、生长停滞及DNA损伤诱导基因153( CHOP)、X-盒-结合蛋白-1( XBP-1)及PDI的表达水平;用特异性LV-PDIA2(9923-1)病毒转染3种细胞,观察PDI过表达对肝癌细胞迁移能力的影响。  结果:无水乙醇处理48h,在HepG2及LO2细胞中GRP78表达上调,而SMMC-7721细胞中GRP78表达下调,分别与无水乙醇处理前比较,P<0.05,有统计学意义。在无水乙醇处理48h,LO2及SMMC-7721细胞中CHOP表达上调,分别与无水乙醇处理前比较,P<0.05,有统计学意义;而在无水乙醇处理前后,HepG2细胞中均无CHOP表达。在无水乙醇处理48h,3种细胞中XBP-1均上调,LO2细胞与无水乙醇处理前比较,P>0.05,无统计学意义;HepG2及SMMC-7721细胞中XBP-1与无水乙醇处理前比较,P<0.05,有统计学意义。无水乙醇处理前,细胞中PDI的表达水平从高到低为SMMC-7721细胞、LO2细胞、HepG2细胞,3种细胞比较P<0.001;无水乙醇处理48h,3种细胞的PDI表达水平均下调,分别与无水乙醇处理前比较,P<0.05,有统计学意义。转染LV-PDIA2(9923-1)病毒前, HepG2细胞迁移能力最弱,其次为LO2细胞,迁移能力最强的为SMMC-7721细胞;转染LV-PDIA2(9923-1)病毒使PDI过表达后,HepG2细胞迁移能力最弱,其次为LO2细胞,迁移能力最强的为SMMC-7721细胞,3种细胞比较P<0.05,有统计学意义;与病毒转染前比较,LO2细胞的迁移能力降低(P=0.03),HepG2细胞和SMMC-7721细胞的迁移能力增强(P<0.05)。  结论:内质网标志物GRP78、CHOP、XBP-1及PDI在正常肝细胞中有一定的表达水平,而在肝癌细胞中的表达水平不同于正常肝细胞,无水乙醇处理48h后这些标志物的表达水平发生变化(HepG2的CHOP除外);在无水乙醇处理前后,SMMC-7721细胞中的PDI表达水平都处于高水平,病毒转染使PDI过表达时该细胞的迁移能力明显增强。
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