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由Erwinia amylovora引起的火疫病是一类毁灭性的细菌病害,常造成严重的经济危害。为了有效防治病害的发生及危害,人们对其致病因子的分子机理作了大量的研究。而许多植物病原细菌毒性因子的产生都依赖于群体感应(quorum sensing,QS)调节系统的调节。 LuxS蛋白参与细菌群体感应(QS)信号分子autoinducer-2(AI-2)合成的最后一步。本研究首次鉴定了Er.amylovora中的luxS同源基因。通过Vibrio harveyi发光检测系统检测到Er.amylovora菌株0056能够合成AI-2,AI-2的最大功能活性出现在对数生长后期。0056分别用AB、LB和NB培养液培养,结果显示在NB中产生AI-2的量最大。Er.amylovora的luxS同源基因在luxS缺陷的菌株Escherichia coli DH5a中表达,发现DH5a可恢复产生AI-2的能力;并通过构建Er.amylovora的luxS突变体进一步证明Er. amylovora中的luxS同源基因在合成AI-2分子中起决定性作用,但其突变体对梨幼果的致病能力并未降低,然而其生长能力与野生菌株相比有所下降,突变体与野生菌株共培养发现突变体几乎不能够生长。我们初步推断AI-2分子可能影响到Er.amylovora对环境的适合度。 SdiA属于与群体效应相关的luxR家族基因,目前已证实存在于Es.coli和Salmonella typhimurium基因组中。本研究从梨火疫病菌中克隆到了一个sdiA的同源基因,该基因与Es.coli和S. typhimurium的sdiA基因在氨基酸水平上分别有45.42%和43.33%的同源性,69.58%和67.08%的相似性。Southern杂交显示其基因在梨火疫基因组中有两个拷贝。此外,本研究根据梨火疫病菌和其它细菌的luxR同源基因序列比对结果设计了一对特异引物F-EA和R-EA,该引物能够特异地区分梨火疫和其它细菌,并能够成功地检测到10cfu的菌体,在含有梨组织浸出液的情况下可检测到10~2CfU的菌体。其研究结果对于梨火疫病菌致病机理的研究及其检疫具有重要的理论和实践意义。