梨火疫病菌群体感应系统的初步研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sssmickey
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
由Erwinia amylovora引起的火疫病是一类毁灭性的细菌病害,常造成严重的经济危害。为了有效防治病害的发生及危害,人们对其致病因子的分子机理作了大量的研究。而许多植物病原细菌毒性因子的产生都依赖于群体感应(quorum sensing,QS)调节系统的调节。 LuxS蛋白参与细菌群体感应(QS)信号分子autoinducer-2(AI-2)合成的最后一步。本研究首次鉴定了Er.amylovora中的luxS同源基因。通过Vibrio harveyi发光检测系统检测到Er.amylovora菌株0056能够合成AI-2,AI-2的最大功能活性出现在对数生长后期。0056分别用AB、LB和NB培养液培养,结果显示在NB中产生AI-2的量最大。Er.amylovora的luxS同源基因在luxS缺陷的菌株Escherichia coli DH5a中表达,发现DH5a可恢复产生AI-2的能力;并通过构建Er.amylovora的luxS突变体进一步证明Er. amylovora中的luxS同源基因在合成AI-2分子中起决定性作用,但其突变体对梨幼果的致病能力并未降低,然而其生长能力与野生菌株相比有所下降,突变体与野生菌株共培养发现突变体几乎不能够生长。我们初步推断AI-2分子可能影响到Er.amylovora对环境的适合度。 SdiA属于与群体效应相关的luxR家族基因,目前已证实存在于Es.coli和Salmonella typhimurium基因组中。本研究从梨火疫病菌中克隆到了一个sdiA的同源基因,该基因与Es.coli和S. typhimurium的sdiA基因在氨基酸水平上分别有45.42%和43.33%的同源性,69.58%和67.08%的相似性。Southern杂交显示其基因在梨火疫基因组中有两个拷贝。此外,本研究根据梨火疫病菌和其它细菌的luxR同源基因序列比对结果设计了一对特异引物F-EA和R-EA,该引物能够特异地区分梨火疫和其它细菌,并能够成功地检测到10cfu的菌体,在含有梨组织浸出液的情况下可检测到10~2CfU的菌体。其研究结果对于梨火疫病菌致病机理的研究及其检疫具有重要的理论和实践意义。
其他文献
套袋果实黑点病是自苹果大面积推广套袋栽培后出现的新病害,而霉心病是一种重要的果实病害,常引起生长期的大量落果及储藏期的烂果,现有研究表明这两种病害主要由粉红单端孢Tric
炭疽叶枯病(Glomerellaleafspot,GLS)是近年来我国苹果上新发现的一种叶部病害,导致苹果早期大量落叶和果实严重病斑,给苹果生产造成重大威胁。尽管炭疽叶枯是新发现的一种病害,目
烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是我国蔬菜、园林、棉花等经济作物的一种重要害虫。90年代后期,烟粉虱种群在我国急剧上升,暴发成灾,对我国的农作物生产造成威胁。为探明烟粉