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目的: 本实验意在通过检测外周血细胞Foxp3mRNA的表达水平探索AD患者外周血CD4+CD25+Tr的情况,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血清中TGF-β(转移生长因子β)及IL-10(白介素-10)的表达水平来讨论其对AD(特应性皮炎)的发病过程起到的作用,为探索其发病机制及治疗方向提供参考。 实验方法: 提取AD组和正常对照组人群的总RNA,反转录成cDNA后,经qRT-PCR检测Foxp3mRNA的表达水平(人GAPDH作为内参照基因)。每一份标本的SYBRⅡ荧光定量PCR反应做3个重复管,取平均CT值计算。同一标本扩增基因得到的CT值分别标记为CTGAPDH和CTFOXP3,以△CT目的基因=CT目的基因-CTGAPDH计算得到△CTFOxP3,△△CT=△CT实验-△CT对照组,差别倍数2-△△CT。用2-△△CT的方法分析比较各组的RNA相对表达水平变化。 采用夹心抗体酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测患者组及对照组血清中IL-10,TGF-β的水平,分别比较两组血清中IL-10,TGF-β水平的差异,用(x)±s表示用SPSS17.0统计软件进行独立样本t检验,P<0.05有统计意义。 实验结果: (一)AD患者及健康人中Foxp3+mRNA表达水平: qRT-PCR结果显示:Foxp3mRNA在AD组的表达和正常对照组比较,表达水平是健康对照组的76.8%,即低于正常组。 (二)AD患者及健康人中IL-10,TGF-β的水平: 1.IL-10水平:患者组为(117.112±60.854)高于对照组(53.609±36.393),差异有统计学意义(P<0.05)。 2.TGF-β水平:患者组(1011.896±575.206)高于对照组(483.533±373.044),差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: 1、AD患者T细胞表达Foxp3较对照组减少。 2、AD患者血清中IL-10,TGF-β的水平较对照组明显增高。