豇豆拮抗内生细菌的筛选、鉴定及抗菌活性的测定

来源 :海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chitianshyitt
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为明确从海南多个地方采集的由豇豆叶片分离出的20株生防内生菌的生理生化性质及其潜在生防价值。本实验利用形态学、平板对峙、PCR技术、生物信息学等方法对20株生防细菌进行鉴定研究。首先,经过革兰氏染色得知其中2、16、19号三株菌为革兰氏阴性菌株,其余为阳性菌;通过解淀粉测定得知,2、16、19三株菌株没有形成不变色透明圈,无解淀粉功能,其余中间形成明显的透明圈,有解淀粉功能;经过V-P测定,发现1、2、11、15、16、18号共6株菌株呈阴性,其余呈阳性;在MR甲基红测定中,1、6、7、10、11号共5株菌株测定呈阳性,其余呈阴性;由氧化酶测定可知2、16、17、19号4株菌株氧化酶测定为阳性,其余为阴性;由接触酶测定得知20株细菌均为阳性。之后提取所有菌株16srDNA,并测序然后上传比对,结果显示,20株内生细菌有3株为假单胞菌属细菌(Pseudomonasspp.),17株为芽孢杆菌属细菌(Bacillus),其中,12株可能为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、5株最相似结果为解淀粉芽孢杆菌(Bacilus amyloliquefaciens)。在之后的平板对峙试验中,以4株病原真菌为靶标病菌,测定20株生防菌对病原真菌的抑制效果,20株生防细菌对4株供试的植物病原真菌均产生了拮抗作用,其抑菌率为29.58%-80.28%,其中抑菌率最高的是18号菌株枯草芽孢杆菌对真菌B橡胶炭疽病菌(C.gloeosporioides),抑菌率为80.28%效果最差的为是2号细菌对真菌A芒果炭疽病菌(C.gloeosporioides),抑菌率为29.58%。不同菌株之间抑制效果差异较大,部分菌株具有良好的抑制效果,我们测定其中生防效果相对较好的7号菌株正丁醇粗提物的最小抑菌浓度(MIC)。接下来,我们通过pcr技术对20株菌中与细菌抑菌活性相关的两个基因sfp和lpa进行了检测,发现全部17株芽孢杆菌属的细菌都有着两个基因,之后又进行了基因序列分析和蛋白结构的预测,为后续生防机理的深入探究和生物药剂的开发奠定了一定的理论基础。
其他文献
实验室、药厂等生化分析领域,实验人员在进行细胞培养、ELISA检测、样本稀释等实验过程中,往往需要使用移液枪从存储液体的容器中将液体取出,并移液加样到微孔板中,以便对待测液体进行分析。由于微孔板透明且孔间距离小,实验人员在移液加样过程中,会出现错加和漏加的问题。基于上述背景,本文提出了一种加样示踪器的设计方案,它采用多传感器检测实验人员使用移液枪时的动作,可准确判断当前操作为吸液操作还是排液操作,
南海西北陆架海是我国重要的渔业养殖、港口航运和油气资源开发区。该海区存在季节性的上升流和下降流,也是台风和海洋中尺度涡等海水垂向运动诱发过程的频发海区。活跃的垂
脑心肌炎病毒(Encephalomy ocarditis virus,EM CV)属小R N A病毒科心病毒属的成员,其宿主谱广泛,可引起人畜急性心肌炎、脑炎、糖尿病、生殖障碍等症状,给国内外养殖业及公共卫生造成巨大的经济损失和危害。近年来针对EMCV的研究愈来愈多,但该病毒的感染机制及致病机理仍不明确。本研究主要基于课题组前期酵母双杂交及病毒覆盖蛋白结合等实验筛选出的能够与病毒蛋白互作的热休克蛋
背景:近年来,新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy,NAC)成为了乳腺癌的治疗过程中的重要方法。化疗相关性中性粒细胞减少(chemotherapy-induced neutropenia,CIN)是化疗常见的不良反应,但同时CIN从一定程度上反应了化疗药物的有效性以及患者对于药物的敏感性。有回顾性研究发现在乳腺癌辅助化疗过程中出现CIN的患者有更好的生存优势,也有研究发现乳
海底多金属硫化物矿床富含Cu、Zn、Au、Ag等多种金属元素,是未来一种重要的海底金属资源。自然电位探测方法能够实现在大面积范围内快速圈定硫化物矿床的位置分布,且对埋藏在
二维半导体锑烯因其优异的光电性质而被广泛关注。然而其间接带隙和宽带隙的缺陷,极大的限制了其在光电领域的应用。发展具有高稳定性、适合带宽、直接带隙和高吸收效率的范
男西装作为男性日常生活和工作中非常重要的服装品类,是男装中最经典的服装款式之一,从正式到非正式的场合几乎都能使用,在任何场合中都演绎着十分重要的角色地位。而目前市
颗粒物质与当今社会的生产与生活息息相关,颗粒粒度作为颗粒的一项重要特征参数其精确测量对于相关领域发展具有重要意义。本文基于Mie散射理论、Fraunhofer衍射理论和小角前
在制浆过程中,由于纤维素与木素的连接,使得木素不能够完全的除去掉。因此研究出纤维素与木素以何种方式连接,连接的位置在纤维素和木素的哪个碳原子上,这对寻找一种高效的酶
多糖是一种具有丰富的生物活性的天然高分子聚合物,其中对于多糖对机体的抗氧化的研究在医学领域已经成为学者研究的热点。本试验主要研究不同浓度的党参多糖(CP)及硫酸化党参