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目的本研究欲通过研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)对人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cell, RPE)细胞的刺激作用来探讨增殖性玻璃体视网膜病变(Proliferative vitreoretinopathy, PVR)的发生机制。方法1.培养ARPE-19细胞,使用Western Blot检测CTGF对ARPE-19细胞外基质成分表达的影响。2.构建p3xFLAG-CMV14/CTGF真核表达载体,设计及合成三对针对CTGF的siRNA,通过Western Blot筛选有效靶点,合成有效靶点的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与线性化的pGC-LV-GFP载体连接,通过PCR筛选阳性克隆并进行DNA测序鉴定；将重组CTGF shRNA (?)的质粒与病毒包装的辅助质粒共转染293T细胞,将包装产生的慢病毒感染ARPE-19细胞,W(?)estern Blot检测CTGF的表达。3.观察TGF-β2对ARPE-19产生CTGF、FN以及α-SMA的表达的影响作用,以及靶向抑制CTGF后,ARPE-19产生CTGF、FN以及MMP-2以及α-SMA的表达受到干扰的情况4.细胞刮伤实验测定CTGF对ARPE-19细胞迁移能力的影响以及靶向抑制CTGF后对于ARPE-19细胞迁移能力的影响结果1. CTGF可以明显刺激ARPE-19细胞的增殖。2.通过双酶切和基因测序证实靶向CTGF的RNA慢病毒载体构建成功,WesternBlot证实经慢病毒感染后的ARPE-19细胞中的CTGF的蛋白水平明显减低。3.TGF-β2刺激了ARPE-19产生CTGF、FN以及α-SMA,而靶向抑制CTGF后,ARPE-19产生CTGF、FN以及MMP-2以及α-SMA的表达受到干扰。4.在细胞刮伤实验中,加入了siCTGF的细胞的迁移能力明显下降。结论CTGF可以明显刺激ARPE-19细胞的增殖并随着时间的增加细胞数亦增加,加入siCTGF后可以明显抑制ARPE-19细胞的增殖,细胞数量下降