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对大肠杆菌属、葡萄球菌属、乳酸杆菌属的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法进行研究,并对经DPV弱毒免疫的樱桃谷鸭消化道(食道全段、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、直肠)和呼吸道内这三种菌群进行定量研究,获如下结果: 1.建立了大肠杆菌属、葡萄球菌属和乳酸杆菌属的FQ-PCR方法,其灵敏度分别达到23.4 cells/μL、2.24 cells/μL和6.98 cells/μL,具有良好特异性,可对鸭消化道和呼吸道内大肠杆菌、葡萄球菌和乳酸杆菌进行定量检测。 2.DPV弱毒口服免疫鸭及其同居鸭消化道和呼吸道内菌群变化 (1) 大肠杆菌属菌群在食道和气管含量(logcop/整段)范围分别为<6.31~11.09和7.58~>11.31,肠道内容物含量(logcop/g)范围<6.31~10.83,与对照鸭相比,波动性变化显著,总体含量上升,随着肠段的后延大肠杆菌属菌群量有上升趋势。 (2) 葡萄球菌属菌群在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00~11.01和0.00~11.28,肠道内容物含量(logcop/g)范围0.00~11.16,与对照鸭无明显差异。 (3) 乳酸杆菌在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00~11.09和0.00~11.09,肠道内容物含量(logcop/g)范围0.00~10.61,与对照鸭无明显差异,随日龄的增长回肠、盲肠、直肠的菌群含量都有明显上升的趋势,与对照鸭的变化趋势相反。 3.DPV弱毒滴鼻免疫鸭及其同居鸭消化道和呼吸道内菌群变化 (1) 大肠杆菌属菌群在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为8.24~11.00和8.72~11.12,肠道内容物含量(logcop/g)范围<6.31~10.83,与对照鸭检测量相比,菌群含量升高,波动性变化显著。 (2) 葡萄球菌属菌群在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00~11.94和0.00~11.82,肠道内容物含量(logcop/g)范围0.00~11.16,与对照鸭检测量相比,波动性变化幅度大,滴鼻鸭气管的菌群检出率明显高于对照鸭,回肠、盲肠、直肠的检出率也有所升高,同居鸭食道、直肠检出量明显高于对照鸭。 (3) 乳酸杆菌在食道和气管内含量(logcop/整段)范围分别为0.00~>11.39和